[发明专利]高效液相色谱法测定化妆品中维生素K1含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及化妆品分析领域，特别是涉及一种高效液相色谱法测定化妆品中维生素K1的方法。

背景技术

维生素K1属维生素类药物，主要用于各种维生素K缺乏引起的出血性疾病的治疗。在化妆品方面，维生素K1特别用于治疗酒糟鼻和弥漫性红斑，并用于在外科手术后使用的膏霜中。然而，由于使用含有维生素K1的化妆品容易引发严重的过敏反应,法国健康品卫生安全局于2006年3月8日签发了关于禁止生产、包装、进口、批发、无偿提供或出售、为了销售或无偿分发或有偿分销而持有以及使用的含有维生素K1化妆品的法规。2009年，欧盟新发布化妆品指令，在化妆品中禁止使用维生素K1。然而，我国暂未出台相关的化妆品规范和标准对维生素K1在化妆品中的使用进行限制。

目前，关于维生素类物质的检测研究报道众多，而针对维生素K1的检测方法主要有液相色谱/紫外检测法、液相色谱-电化学检测法、液相色谱-柱后衍生法和液相色谱-串联质谱法。研究对象主要是奶粉、食品及药品注射液等，而关于化妆品中维生素K1的检测方法较少，由于化妆品样品种类繁多，基质复杂，以上方法较难应用化妆品中维生素K1的检测。谭建华等建立了反相高效液相色谱法测定化妆品中维生素K1，但该方法前处理较为繁琐，对于膏霜等样品需要采用固相萃取进行净化，且很难应用于精油样品的检测。

综上所述，采用新型色谱分离技术对各种类型的化妆品中的维生素K1进行准确定量测定，能促进对日用化工产品的产品质量进行有效地监督和管理，对保证消费者的健康安全具有非常重要的意义。

发明内容

基于此，有必要提供一种前处理简单、能适用各种类型的化妆品的高效液相色谱法测定化妆品中维生素K1含量的方法。

一种高效液相色谱法测定化妆品中维生素K1含量的方法，包括以下步骤：

(1)、制备供试样品

精确称取样品，加入正己烷提取2-3次，或加入乙腈将所述样品分散，再加入正己烷提取2-3次，合并提取液，正己烷定容，冷冻离心，上清液过滤膜，即为供试样品；

(2)、高效液相色谱测定

将步骤(1)的供试样品进行高效液相色谱测定，色谱条件为：

色谱柱：Si柱；

柱温：25-35℃；

流动相：二氯甲烷：正己烷=40-60：60-40V/V；

流速：0.8-1.2mL/min；

洗脱时间：8-12分钟；

检测波长：265-275nm。

在其中一个实施例中，步骤(2)中所述色谱柱的规格为4.6x250mm，5μm。

在其中一个实施例中，步骤(2)中所述柱温为30℃。

在其中一个实施例中，步骤(2)中所述流动相为体积比40:60的二氯甲烷和正己烷。

在其中一个实施例中，步骤(2)中所述流速为1mL/min，洗脱10分钟。

在其中一个实施例中，所述步骤(1)为：准确称取1.0g水剂类化妆品，加入5mL正己烷，充分涡旋提取2min，15000r/min离心5min,取上清液，再加5mL正己烷，重复以上步骤，合并上清液，正己烷定容至10mL，0.45μm滤膜过滤，得到供试样品。

在其中一个实施例中，所述步骤(1)为：准确称取1.0g膏霜或乳液类化妆品，加入4mL乙腈，漩涡振荡使样品分散，加入5mL正己烷，充分涡旋提取2min，15000r/min离心5min,取上清液，再加5mL正己烷，重复以上步骤，合并上清液，正己烷定容至10mL，0.45μm滤膜过滤，得到供试样品。

在其中一个实施例中，所述步骤(1)为：准确称取1.0g精油类化妆品，加入正己烷并定容至10mL，充分涡旋提取2min，超声提取10min，15000r/min离心5min，0.45μm滤膜过滤，得到供试样品。

本发明采用正相高效液相色谱法测定化妆品中维生素K1的含量，对维生素K1含量的定量限（S/N=10）为5.0mg/kg，平均回收率为92.4%～102.0%，相对标准偏差小于8.6%。采用本发明的方法检测化妆品中维生素K1的含量，前处理简单，基质干扰小且准确度高，能适用于各种不同类型化妆品中维生素K1含量的准确测定，也非常适合化妆品中维生素K1的批量检测；为化妆品产品质量控制，化妆品产品安全监测提供重要技术支持，具有良好的经济与社会效益。

附图说明

图1为本发明实施例1的维生素K1的标准溶液色谱图；

图2为本发明实施例1的维生素K1的标准曲线图；

图3为本发明实施例1的化妆水供试样品色谱图；