[发明专利]一种仙灵骨葆的提取方法、分离提取物及制剂

权利要求书

1.一种仙灵骨葆的提取方法，其特征在于，所述提取方法包括如下步骤：

（1）按重量份计称取淫羊藿600-1500份、丹参50-150份、补骨脂50-150份、续断80-200份、知母50-150份和地黄50-150份，优选地淫羊藿1167份、丹参83份、补骨脂83份、续断167份、知母83份和地黄83份;

（2）将断续、丹参、补骨脂粉碎成细粉；淫羊藿、知母和地黄混合后经水提得到水提物，浓缩至稠膏，加入上述细粉，混匀，干燥，得到仙灵骨葆原料粉；

（3）取和/或称量所述仙灵骨葆原料粉，以10-95%乙醇水溶液浸渍过夜，回流提取；提取液过滤，滤液减压回收溶剂至无醇味，加入蒸馏水定容，混合均匀，得到仙灵骨葆原料粉提取物；

（4）将仙灵骨葆原料粉提取物混悬于蒸馏水中，离心，抽滤，取滤液上色谱柱，分别以水和乙醇水溶液进行梯度洗脱，优选地以水、25-40%乙醇水溶液、75-98%乙醇水溶液梯度洗脱，分别收集水和乙醇水溶液的洗脱物，减压回收溶剂至无醇味，加入蒸馏水定容，混合均匀，得到仙灵骨葆分离提取物。

2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，在所述步骤2中，淫羊藿、知母和地黄加水煎煮2-4次，每次0.5-4小时，优选地加水煎煮三次，时间分别为3、2、1小时，合并煎液，浓缩至30℃下相对密度为1.35-1.38的稠膏，加入上述细粉，混匀，干燥，得到仙灵骨葆原料粉。

3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，在所述步骤3中，取仙灵骨葆原料粉，以8-12倍的50-75%的乙醇水溶液、优选10倍60%的乙醇水溶液浸渍过夜，优选在加热条件下回流提取1-3次，每次1-3小时，优选地回流提取2次，每次2小时；提取液过滤，滤液减压回收溶剂至无醇味，加入10-20倍量蒸馏水定容，混合均匀，得到所述仙灵骨葆原料粉提取物。

4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述方法还包括计算所述仙灵骨葆原料粉提取物中干物质收率的步骤，其包括称取一小部分所述仙灵骨葆原料粉提取液，用水稀释，冷冻干燥，得到干物质，计算收率。

5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，在所述步骤4中，将所述仙灵骨葆原料粉提取物混悬于按重量计10-15倍量蒸馏水中，对所得溶液进行第一次离心，抽滤，取滤液上大孔吸附树脂色谱柱，分别以水、25-40%乙醇水溶液、75-98%乙醇水溶液洗脱、优选地以水、30%乙醇水溶液、95%乙醇水溶液梯度洗脱，分别收集各自的洗脱物，减压回收溶剂至无醇味，加入10-20倍蒸馏水定容，混合均匀，得到仙灵骨葆分离提取物。

6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，在所述步骤4中，色谱柱体积按体积计为上样量的0.8-1.2倍，作为洗脱液的水的用量为4倍的柱体积，25-40%的乙醇水溶液用量为4倍的柱体积，75-98%的乙醇水溶液用量为4倍的柱体积。

7.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述方法还包括将第一次离心后的滤渣以25-40%乙醇混旋，进行第二次离心，将所得的上清液上大孔吸附树脂色谱柱，以25-40%乙醇水溶液洗脱，得到洗脱物，合并入步骤4中得到的25-40%乙醇水溶液的洗脱物；将第二次离心后的滤渣合并入步骤4中得到的75-98%乙醇水溶液的洗脱物。

8.根据权利要求3或7所述的提取方法，其特征在于，所述方法还包括计算水、25-40%乙醇水溶液、75-98%乙醇水溶液的洗脱物中的干物质收率的步骤，其包括在对水、25-40%乙醇水溶液、75-98%乙醇水溶液的洗脱物减压回收溶剂至无醇味后，用蒸馏水进行定容，取一小部分用蒸馏水进行稀释，冷冻干燥，得到干物质，计算收率。

9.一种仙灵骨葆分离提取物，其特征在于，所述分离提取物通过权利要求1-8中任一项所述的方法提取得到。

10.含有权利要求9所述仙灵骨葆分离提取物的仙灵骨葆制剂。