[发明专利]猪圆环病毒Ⅱ型基因工程亚单位疫苗及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种可溶性融合蛋白，其特征在于，包括由大肠杆菌表达猪圆环病毒II型衣壳蛋白基因得到的蛋白，所述猪圆环病毒II型衣壳蛋白基因经过定位信号区域剪切和定点突变，所述定点突变包括将密码子AGA或AGG突变为CGC。

2.根据权利要求1所述的可溶性融合蛋白，其特征在于，所述定点突变的部位包括位于猪圆环病毒II型衣壳蛋白的如下至少一组氨基酸残基位点：1)第97和第99位；2)第116位；3)第180位；4)第186位；5)第222位。

3.根据权利要求2所述的可溶性融合蛋白，其特征在于，所述定点突变的部位包括位于猪圆环病毒II型衣壳蛋白的如下氨基酸残基位点：6)第97，99，116位；或7)第97，99，180，186位。

4.根据权利要求1所述的可溶性融合蛋白，其特征在于，所述定位信号区域剪切包括所述猪圆环病毒II型衣壳蛋白基因5’端剪切掉39～159bp的DNA链；优选地，69～123bp；优选地，105bp。

5.如权利要求1至4中任一项所述的可溶性融合蛋白在制备猪圆环病毒II型疫苗中的应用。

6.编码如权利要求1至4中任一项所述的可溶性融合蛋白的DNA序列。

7.一种载体，其特征在于，包含如权利要求6所述的DNA序列。

8.一种宿主细胞，其特征在于，包含如权利要求7所述的载体。

9.根据权利要求8所述的宿主细胞，其特征在于，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2012474。

10.一种猪圆环病毒II型疫苗，其特征在于，包括如权利要求1至4中任一项所述可溶性融合蛋白。

11.根据权利要求10所述的疫苗，其特征在于，进一步包括佐剂，所述佐剂包括氢氧化铝胶和CpG-DNA。

12.根据权利要求10或11所述的疫苗、，其特征在于，通过如权利要求8或9所述的宿主细胞培养、提取抗原蛋白，然后添加佐剂制备而来。

13.如权利要求10或11所述的猪圆环病毒II型疫苗在预防猪圆环病毒II型引起的猪相关疾病中的应用。

14.根据如权利要求13所述的应用，其特征在于，对21日龄的猪进行免疫注射。