[发明专利]25羟维生素D检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种25羟维生素D检测试剂盒，其包含：

第一试剂，和

第二试剂；

其中，

第一试剂包含25羟维生素D抗体、维生素D结合蛋白抗体和缓冲液，

第二试剂包含结合有25羟维生素D抗原的微球和缓冲液。

2.根据权利要求1所述的25羟维生素D检测试剂盒，其中

所述缓冲液选自磷酸缓冲液、甘氨酸缓冲液、MES缓冲液、硼酸缓冲液、醋酸盐缓冲液、2-吗啉乙磺酸缓冲液或氯化铵缓冲液中的一种或几种；

所述缓冲液浓度为10-500mM。

3.根据权利要求1所述的25羟维生素D检测试剂盒，其中

所述维生素D结合蛋白抗体为多克隆抗体或单克隆抗体；

所述25羟维生素D抗体为多克隆抗体或单克隆抗体；

其中多克隆抗体源自兔、羊或鸡，单克隆抗体源自鼠或兔。

4.根据权利要求1所述的25羟维生素D检测试剂盒，其中

所述25羟维生素D抗原为自然抗原或人工合成抗原。

5.根据权利要求1所述的25羟维生素D检测试剂盒，其中

所述微球是由聚苯乙烯、丙烯酸、丙烯酸相关酯类中的一种或几种聚合而成的胶乳颗粒；微球直径在150-500nm之间。

6.根据权利要求1所述的25羟维生素D检测试剂盒，其还包括校准品，所述校准品包含已知浓度的25羟维生素D。

7.一种结合有25羟维生素D抗原的微球的制备方法，所述方法包括步骤：

活化25羟维生素D抗原；

活化微球；

将活化的25羟维生素D抗原与活化的微球连接，从而获得结合有25羟维生素D抗原的微球。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其中所述活化25羟维生素D抗原的步骤所用的试剂选自羰基二咪唑、无水丙酮、二氨基二丙基亚胺、乙基二甲基胺丙基碳化二亚胺和2-吗啉乙磺酸中的一种或多种。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其中所述微球为羧基修饰的微球。

10.根据权利要求7所述的制备方法，其中所述活化25羟维生素D抗原的步骤与所述活化微球的步骤的操作顺序是可互换的。