[发明专利]弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基及发酵方法

权利要求书

1.一种弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基，包括一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基，其特征在于上述一级种子培养基中含有花生饼粉和玉米油，二级种子培养基和发酵培养基中均含有混合鱼粉、花生饼粉和玉米油。

2.按照权利要求1所述的弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素培养基，其特征在于上述一级种子培养基的组成为：玉米油15～20ml/L、玉米蛋白粉10～20g/L、花生饼粉15～20g/L、玉米浆2～3g/L、磷酸氢二铵0.3～0.4g/L、碳酸钙1～2g/L。

3.按照权利要求1所述的弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基，其特征在于上述二级种子培养基的组成为：玉米油15～20ml/L、玉米蛋白粉10～20g/L、花生饼粉15～20g/L、磷酸氢二铵0.3～0.4g/L、碳酸钙1～2g/L、混合鱼粉10～15g/L、玉米浆2～3g/L。

4.按照权利要求1所述的弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基，其特征在于上述发酵培养基的组成为：玉米油25～30ml/L、玉米蛋白粉20～22g/L、花生饼粉10～12g/L、混合鱼粉6～8g/L、磷酸氢二铵0.1～0.2g/L、碳酸钙2.5～3g/L、盐酸甜菜碱0.6～0.8g/L、氯化钴0.005～0.007g/L、氯化钾0.9～1g/L、氯化钠0.9～kg/L、硫酸镁0.8～0.9g/L。

5.一种利用权利要求1至4任意一项培养基的发酵方法，其工艺步骤包括：

1)一级种子培养：首先将一级种子培养基灭菌，冷却，并用无菌空气保压，然后在火焰保护下，将已经培养好的弗氏链霉菌母瓶发酵液接入一级种子罐进行培养，接种量控制在一级种子培养基体积的5～10％；

2)二级种子培养：先将二级种子培养基灭菌，冷却，并用无菌空气保压，然后将一级种子液全部移入二级种子罐进行培养；

3)发酵培养：先将发酵培养基灭菌，冷却，并用无菌空气保压，然后将二级种子液全部移入发酵罐进行培养。

6.按照权利要求5所述的发酵方法，其特征在于所述一级种子培养条件为：罐压0.02～0.04MPa；罐温28～32℃；空气流量：0～12h，50～60m³/h；12h～移种：120～130m³/h；搅拌转速100～120r/min；pH6～8；培养时间20～30h。

7.按照权利要求5所述的发酵方法，其特征在于所述二级种子培养条件为：罐压0.02～0.04MPa；罐温28～33℃；空气流量1000～1100m³/h；搅拌转速150～160r/min；pH值6～8；培养时间：30～40h。

8.按照权利要求5所述的发酵方法，其特征在于所述发酵培养条件为：

a 脂肪控制：发酵培养基灭菌后脂肪控制在2～3％；

b 发酵开始～组分转化前：培养温度28～32℃、搅拌转速200～220r/min；

c 组分转化开始～发酵结束：温度35～38℃、转速250～260r/min；

d 发酵周期：培养时间160～180h；

e 压力控制：罐压0.05～0.06MPa；

f pH控制：发酵过程中pH6.0～7.5；

g 无菌检查：发酵过程中进行菌检，要求无其它杂菌；

h 空气流量：0h～组份开始转化前：1800～1900m³/h；组份转化开始～发酵结束：1500～1600m³/h。

9.按照权利要求5所述的发酵方法，其特征在于发酵过程中的移种条件为：

a 一级种子液移种标准：一级种子培养结束，其菌体浓度15～25％；pH值6～8；无其它杂菌污染；

b 二级种子液移种标准：二级种子培养结束，其菌体浓度30～40％；pH值6～8；周期30～40h；无其它杂菌污染。