[发明专利]一种人肝癌细胞系HLCZ01及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物动物细胞领域，尤其涉及一种人肝癌细胞系及其应用。 

背景技术

肝脏具有多种重要的生理功能，主要包括：合成和分泌大量的血清蛋白，如白蛋白和脂蛋白；合成和转运与蛋白结合的脂质；解毒功能；合成分泌胆汁；合成糖来调节血糖；分解氨基酸合成尿素；激活维生素；合成和分解糖原；合成谷胱甘肽和金属硫蛋白等。 

随着生物技术的进步，利用基因重组和细胞融合的方法可以生产很多有用的生物制品，但相比之下，动物细胞培养技术比以前显得更加重要。考虑到肝脏具有比其他器官更多的生理功能，包括其显著的合成和分泌胞浆蛋白的功能，且拥有更强的合成白蛋白、脂蛋白、运输脂质、尿素、糖原、谷胱甘肽的能力和更强的代谢能力，这使得使研究者更有兴趣利用肝脏细胞培养生产上述产品。基于此，为了研究肝脏功能并生产相关的生物制品，需要培养肝细胞。然而，目前的细胞培养技术并不能在肝细胞的培养时期生产出血浆蛋白等生物制品，正常肝细胞离体后活力极速下降，这导致相关产品的获得变得十分困难。 

肝脏也是成人体内少数可以再生的器官，但是在培养皿中培养的肝细胞传代次数有限，不能反复培养。 

已有的一些肝细胞系由于是非人源的或与人肝细胞相差较大而不能广泛应用。目前已有一些来源于实验动物的肝细胞系，比如来源于大鼠(Tsao et.al.，Exp.Cell Res.，1984，154：38-52；Enat et al.，Proc.Nat.Acad.Sci USA，1984，87：1411-1415)，利用无血清培养基建立的来源于成年大鼠肝脏的大鼠上皮细胞(Chessebeuf and Padieu，In Vitro，1984，20：780-795；Enat et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.，1984，81：1411-1415)。大鼠肝细胞中还可转入SV40DNA(Woodworth et al.，Cancer Res.，1987，46：4018-4026；Ledley et al.，Proc.Nat.Acad.Sci.USA，1987，84：5335-5339)，但是由于和人的肝细胞代谢不同，这种细胞不能用于研究人体内药物代谢和肝癌生成。 

此外，人肝细胞无性繁殖也已有相关报道(Kaighn and Prince，Proc.Nat.Acad.Sci.，1971，68：2396-2400)，长期培养的人胎肝也已经建立(Salas-Prato，M.et al.，In Vitro Cell Dev.Biol.，1988，24：230-238；Sells，M.A.et al.，InVitro Cell Dev.Biol.，1985，21：216-220)，但是由于胎肝和成年肝在代谢方面的差异，使得胎肝在肿瘤生成和毒理研究方面的应用受到局限，成年肝更易用于肿瘤生成和毒理研究。