[发明专利]一种规模化生产转移因子的方法有效
申请号: | 201310026879.2 | 申请日: | 2013-01-24 |
公开(公告)号: | CN103054902A | 公开(公告)日: | 2013-04-24 |
发明(设计)人: | 张立武;关受江;徐刚 | 申请(专利权)人: | 重庆永健生物技术有限责任公司 |
主分类号: | A61K35/28 | 分类号: | A61K35/28;A61P37/02;A61P31/04;A61P31/12 |
代理公司: | 云南派特律师事务所 53110 | 代理人: | 龚笋根 |
地址: | 402460*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 规模化 生产 转移因子 方法 | ||
1.一种祛除脾脏细胞匀浆液中的细胞残渣的方法,步骤包括:脾脏细胞破碎后调节pH值为5-9,然后加入聚氯化铝搅拌均匀,然后过滤残渣或者离心收集清液即得。
2.根据权利要求1所述的一种祛除脾脏细胞匀浆液中的细胞残渣的方法,其特征在于:所述的聚氯化铝加入匀浆后静置半小时。
3.根据权利要求1所述的一种祛除脾脏细胞匀浆液中的细胞残渣的方法,所述的匀浆调节pH值为7.2。
4.一种规模化生产转移因子的方法,包括先将脾脏细胞破碎制备为匀浆液,然后祛除匀浆液中的细胞残渣,然后提取转移因子,其特征在于:所述祛除匀浆液中细胞残渣的步骤包括:
将匀浆液用2mol/L NaOH溶液调节pH值为7.2;
细胞破碎后的脾脏匀浆液按质量体积比1%的比例在匀浆液中添加聚氯化铝,搅拌均匀,作用30分钟;
用离心机离心,保证匀浆液加入后离心时间不少于30秒,收集得到离心液;
按上述方法将离心液再重复离心3次,每次按质量体积比分别加入0.5%、0.4%、0.1%的聚氯化铝,加入聚氯化铝后都搅拌均匀,作用30分钟;
离心液初步过滤得比浊度为1的粗滤液;
粗滤液用过滤精度为0.2μm的滤膜精滤。
5.根据权利要求4所述的一种规模化生产转移因子的方法,其特征在于:所述调节pH值之前用胶体磨进行第二次匀浆,胶体磨磨齿间距为9μm。
6.根据权利要求4或5所述的一种规模化生产转移因子的方法,其特征在于:所述的转移因子的提取步骤包括:
用截留分子量为6000道尔顿的超滤设备将精滤液进行超滤,将精滤液中的蛋白质全部滤除;
超滤液用装有过滤精度为0.2μm的过滤器过滤除菌得产品。
7.根据权利要求6所述的一种规模化生产转移因子的方法,其特征在于:产品在-20℃条件下保存;或者冻干制备成粉剂。
8.根据权利要求4所述的一种规模化生产转移因子的方法,其特征在于:所述的脾脏细胞破碎制备为匀浆液的步骤包括:
用绞肉机将脾脏绞碎呈糊状液;
用4℃的灭菌注射用水按1:1体积稀释,搅拌均匀;
调节胶体磨磨齿间距为15μm,用胶体磨匀浆5分钟,期间保证物料温度不高于15℃;
将匀浆液用2mol/L的HCl溶液调节pH值至4.0;
在-20℃的冷库中充分冻实,在4℃的流动水中解冻,如此反复冻融6次。
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