[发明专利]一种规模化生产转移因子的方法有效

专利信息
申请号: 201310026879.2 申请日: 2013-01-24
公开(公告)号: CN103054902A 公开(公告)日: 2013-04-24
发明(设计)人: 张立武;关受江;徐刚 申请(专利权)人: 重庆永健生物技术有限责任公司
主分类号: A61K35/28 分类号: A61K35/28;A61P37/02;A61P31/04;A61P31/12
代理公司: 云南派特律师事务所 53110 代理人: 龚笋根
地址: 402460*** 国省代码: 重庆;85
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摘要:
搜索关键词: 一种 规模化 生产 转移因子 方法
【权利要求书】:

1.一种祛除脾脏细胞匀浆液中的细胞残渣的方法,步骤包括:脾脏细胞破碎后调节pH值为5-9,然后加入聚氯化铝搅拌均匀,然后过滤残渣或者离心收集清液即得。

2.根据权利要求1所述的一种祛除脾脏细胞匀浆液中的细胞残渣的方法,其特征在于:所述的聚氯化铝加入匀浆后静置半小时。

3.根据权利要求1所述的一种祛除脾脏细胞匀浆液中的细胞残渣的方法,所述的匀浆调节pH值为7.2。

4.一种规模化生产转移因子的方法,包括先将脾脏细胞破碎制备为匀浆液,然后祛除匀浆液中的细胞残渣,然后提取转移因子,其特征在于:所述祛除匀浆液中细胞残渣的步骤包括:

将匀浆液用2mol/L NaOH溶液调节pH值为7.2;

细胞破碎后的脾脏匀浆液按质量体积比1%的比例在匀浆液中添加聚氯化铝,搅拌均匀,作用30分钟;

用离心机离心,保证匀浆液加入后离心时间不少于30秒,收集得到离心液;

按上述方法将离心液再重复离心3次,每次按质量体积比分别加入0.5%、0.4%、0.1%的聚氯化铝,加入聚氯化铝后都搅拌均匀,作用30分钟;

离心液初步过滤得比浊度为1的粗滤液;

粗滤液用过滤精度为0.2μm的滤膜精滤。

5.根据权利要求4所述的一种规模化生产转移因子的方法,其特征在于:所述调节pH值之前用胶体磨进行第二次匀浆,胶体磨磨齿间距为9μm。

6.根据权利要求4或5所述的一种规模化生产转移因子的方法,其特征在于:所述的转移因子的提取步骤包括:

用截留分子量为6000道尔顿的超滤设备将精滤液进行超滤,将精滤液中的蛋白质全部滤除;

超滤液用装有过滤精度为0.2μm的过滤器过滤除菌得产品。

7.根据权利要求6所述的一种规模化生产转移因子的方法,其特征在于:产品在-20℃条件下保存;或者冻干制备成粉剂。

8.根据权利要求4所述的一种规模化生产转移因子的方法,其特征在于:所述的脾脏细胞破碎制备为匀浆液的步骤包括:

用绞肉机将脾脏绞碎呈糊状液;

用4℃的灭菌注射用水按1:1体积稀释,搅拌均匀;

调节胶体磨磨齿间距为15μm,用胶体磨匀浆5分钟,期间保证物料温度不高于15℃;

将匀浆液用2mol/L的HCl溶液调节pH值至4.0;

在-20℃的冷库中充分冻实,在4℃的流动水中解冻,如此反复冻融6次。

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