[发明专利]一种百草妇炎清栓指纹图谱的建立方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种百草妇炎清栓指纹图谱的建立方法，以及由此方法所得到的百草妇炎清栓标准指纹图谱。

背景技术

百草妇炎清栓为已经上市的中成药，具有清热解毒、祛瘀收敛、杀虫止痒。适用于治疗及预防妇女霉菌性、滴虫性、细菌性、淋菌性阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂、白带过多及老年性阴道炎等妇科常见疾病。

百草妇炎清栓是在总结贵州苗族验方的基础上，结合现代化的医药科技研制开发的新一代理想妇科阴道外用药。它由苦参、百部、蛇床子、仙鹤草、紫珠叶、白矾、冰片和樟脑等8味药材组成，对滴虫、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、真菌等多种阴道致病菌有较强的杀灭和抑制作用，同时可促进受损上皮组织的修复，对创伤面有较强的收敛作用，并且能够提高机体的粘膜免疫功能。

中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。中药及其制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法，建立中药指纹图谱将能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。在此基础上，如果进一步开展谱效学研究，可使中药质量与其药效真正结合起来，有助于阐明中药作用机理。目前，尚无百草妇炎清栓指纹图谱研究工作的报道。

本发明建立百草妇炎清栓指纹图谱，旨在建立一种新的质量控制方法，是一种具有创新性的研究工作，可以为本产品的技术提升与深度开发提供依据。

发明内容

本发明的目的是通过百草妇炎清栓的指纹图谱，提供一种新的质量控制方法，明确该指纹图谱的建立步骤，并建立其标准指纹图谱。

百草妇炎清栓指纹图谱的建立方法如下：

(1)对照品溶液的制备：称取苦参碱2～10mg、槐果碱2～10mg，置于5-20ml量瓶中，加入甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得苦参碱、槐果碱的混合对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：称取百草妇炎清栓样品2～10g，置水浴上使熔化，加0.15-0.6ml氨水，加硅藻土5-20g，研匀，加氯仿25-100ml，超声15-60min，补重，过滤，取滤液10-40ml，蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至5-20ml，过0.2-0.8μm微孔滤膜，作为供试品溶液；

(3)百草妇炎清栓指纹图谱的测定：吸取供试品溶液、对照品溶液各10～30μL，分别注入液相色谱仪，按照高效液相色谱法测定，得到色谱图；

其中色谱条件为：色谱柱：250mm×4.6mm，5μm的Comatex C18-AA柱；流动相：乙腈(A)-用磷酸调节pH为6-7的0.02-0.08％的三乙胺缓冲液(B)；梯度洗脱：0→100min，A的体积百分比10％→60％，流速0.5-2ml/min，检测波长：210～230nm，柱温：20～40℃，进样量：10～30μL。

优选的，方法如下：

(1)对照品溶液的制备：称取苦参碱2～10mg、槐果碱2～10mg，置于10ml量瓶中，加入甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得苦参碱、槐果碱的混合对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：称取百草妇炎清栓样品2～10g，置水浴上使熔化，加0.3ml氨水，加硅藻土10g，研匀，加氯仿50ml，超声30min，补重，过滤，取滤液20ml，蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至10ml，过0.45μm微孔滤膜，作为供试品；

(3)百草妇炎清栓指纹图谱的测定：吸取供试品溶液、对照品溶液各10～30μL，分别注入液相色谱仪，按照高效液相色谱法测定，得到色谱图；

其中色谱条件为：250mm×4.6mm，5μm的Comatex C18-AA柱；流动相：乙腈(A)-用磷酸调节pH为6-7的0.04％的三乙胺缓冲液(B)；梯度洗脱：0→100min，A的体积百分比10％→60％；流速1ml/min，检测波长210～230nm，柱温20～40℃，进样量10～30μL。

最优选的方法如下：

(1)对照品溶液的制备：称取苦参碱4.08mg、槐果碱5.02mg，置于10ml量瓶中，加入甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得苦参碱0.408mg/ml、槐果碱0.502mg/ml的混合对照品溶液；