[发明专利]一组倍半萜香豆素、倍半萜色原酮类化合物

权利要求书

1.一组多伞阿魏中的倍半萜香豆素、倍半萜色原酮类化合物，其结构如下：

化合物1，Ferulin A

化合物2，Ferulin B

化合物3，Ferulin C

化合物4，Ferulin D

化合物5，Ferulin E

2.权利要求1的化合物在制备具有抗凝、抗炎、抗肿瘤、抗过敏、免疫抑制、解热、镇痛、抗生育、雌激素样作用、抑菌杀虫、抗HIV、平喘、解痉、抗忧郁、消积止痢、抗惊厥、抗癫痫、抗溃疡作用的药物中的应用。

3.含有权利要求1的化合物的组合物。

4.权利要求1的化合物，用于药品、功能食品和食品的原料。

5.权利要求1化合物的制备方法，其特征在于，经过以下步骤：

多伞阿魏(Ferula ferulaeoides Steud.Korov.)根10公斤，用十倍量95％乙醇回流提取三次，每次4h，提取液减压浓缩除去醇后制成水的混悬液，用乙酸乙酯萃取三次，得到乙酸乙酯层浸膏2.4公斤；

乙酸乙酯层浸膏360g，经硅胶吸附柱色谱(拌样硅胶用量：300g；空白硅胶用量：450g)，以石油醚-丙酮系统(100:0-1:1)梯度洗脱，每一个梯度回收溶剂后合并，得到馏分A-N，馏分G(PE-Acetone,100:7)(10.8g)，经ODS开放柱，甲醇-水系统（60:1-90:1）梯度洗脱，得到8个馏分G1-G8，其中馏分G5（MeOH-H₂O，73:27)(2.5g)，经硅胶柱色谱，以石油醚/乙酸乙酯/丙酮为溶剂进行梯度洗脱，得到10个馏分G5a-G5j，其中馏分G5i(145.0mg)(PE-Acetone-EtOAc,100:7:7)，经制备型HPLC，以80%甲醇-水作为流动相，制得化合物5(108.0mg)，馏分G8（MeOH-H₂O，82:18)经制备型HPLC，以78%甲醇-水作为流动相，制得化合物2(105.0mg)；

馏分H(PE-Acetone,100:10)(8.4g)，经ODS开放柱，甲醇-水系统（60:1-90:1）梯度洗脱，得到8个馏分H1-H8，其中馏分H4（MeOH-H₂O，70:30)(101.0mg)，经制备型HPLC，以80%甲醇-水作为流动相，制得化合物4(4.0mg)；

馏分I(PE-Acetone,100:15)(10.4g)，经ODS开放柱，甲醇-水系统（60:1-90:1）梯度洗脱，得到8个馏分I1-I8，其中馏分I3（MeOH-H₂O，65:35)(102.0mg)，经制备型HPLC，以75%甲醇-水作为流动相，制得化合物3(24.0mg)；

馏分J(PE-Acetone,100:20)(8.4g)，经ODS开放柱，甲醇-水系统（60:1-90:1）梯度洗脱，得到8个馏分J1-J8，其中馏分J2（MeOH-H₂O，60:40)(62.0mg)，经制备型HPLC，以55%乙腈-水作为流动相，制得化合物1(16.0mg)。

6.权利要求1的化合物的检测方法，其特征在于，方法如下：

分析方法：HPLC分析，以质谱(MS)检测、紫外(UV)检测、圆二色谱(CD)检测、蒸发光散射检测器等为检测器，

对照品溶液的配置：权利要求1中倍半萜、倍半萜香豆素、倍半萜色原酮类化合物化学对照品精密称取适量，用甲醇配制成适量的对照品溶液，

样品溶液的配置：精密称取多伞阿魏药材样品适量，用100ml甲醇（或氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙腈、石油醚、环己烷等有机溶剂及其不同浓度的水溶液）提取，回收提取液，甲醇（或氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙腈、石油醚、环己烷等有机溶剂及其不同浓度的水溶液）溶解，经装填ODS的SPE小色谱柱预处理，甲醇（或乙腈、乙酸乙酯、丙酮、氯仿、石油醚、环己烷等有机溶剂及其不同浓度的水溶液）洗涤，合并洗脱液，甲醇溶解，定容，过滤，即得，

色谱流动相条件：

1）乙腈-水梯度洗脱，洗脱条件如下表

时间（min）乙腈水0.0060.040.015.0070.030.035.0085.015.050.00100.00.053.00100.00.0

2）甲醇-水梯度洗脱，洗脱条件如下表

时间（min）甲醇1%甲酸水0.0065.035.020.0074.026.035.0087.013.050.00100.00.053.00100.00.0

色谱柱：十八烷基键合硅胶柱

测试方法：进行HPLC分析，以质谱(MS)检测、紫外(UV)检测、圆二色谱(CD)检测、蒸发光散射检测器等为检测器，以样品中各化合物的色谱峰面积，与标准对照样品相应色谱峰面积，按照标准曲线法或外标1点法、外标2点法，进行定量分析，计算，即得。