[发明专利]一种提取天然皂素及生物表面活性剂复合产物的方法

权利要求书

1.一种提取天然皂素及生物表面活性剂复合产物的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）原料预处理：

风干无患子果皮和/或皂荚荚果作为皂素原料，经分拣、粉碎及过筛后，备用；

（2）皂素水浸提：

皂素原料与水以重量比1:3～1:8，在水浴温度50～70℃下浸提2～6h；离心，取上清液为酶解发酵底物；

（3）酶解水提液：

以pH调节剂将上清液pH值调至4.5～5.0；向其中加入浓度为420～480IU/L的纤维二糖酶，在40～50℃，150～200rpm的恒温震荡培养箱内水解糖化90～120h；

（4）接种菌种；

将酶水解液作为发酵底物；同时加入灭菌发酵培养基；接种铜绿假单胞菌和/或丘陵假丝酵母，菌种接种量分别为2%～8%；

（5）发酵培养：

接种后的发酵体系在28～32℃下，120～150rpm的恒温震荡培养箱发酵160～180h；

（6）离心分离：

以离心机分离发酵悬浮液中固液两相，液相即为天然皂素与生物表面活性剂的复合产物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）为：风干无患子果皮和/或皂荚荚果作为皂素原料，经分拣去杂后控制水分≤12%，杂质≤0.5%；用粉碎机粉碎，过12目筛，备用。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中，皂素原料与水的最佳重量比1:5～1:7；水浴温度为60℃；浸提时间为3～5h。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤（3）为：以pH调节剂将上清液pH值调至4.8；向其中加入浓度为450IU/L的纤维二糖酶，在45℃，180rpm的恒温震荡培养箱内水解糖化96h。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤（4）为：将酶水解液pH值调至6.8～7.2，作为铜绿假单胞菌的发酵底物；同时加入灭菌发酵培养基A；接种铜绿假单胞菌，菌种接种量为2%～8%。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述灭菌发酵培养基A，按重量百分比计，具体组分为：

培养基A：NaNO₃g/L，MgSO₄·7H₂O0.25g/L，KH₂PO₄0.25g/L，酵母膏1.0g/L。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤（4）为：将酶水解液直接作为丘陵假丝酵母的发酵底物；同时加入灭菌发酵培养基B；接种丘陵假丝酵母，菌种接种量为2～8%。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述灭菌发酵培养基B，按重量百分比计，具体组分为：

培养基B：KH₂PO₄0.1%，NaHPO₄·12H₂O0.1%，MgSO₄·7H₂O0.05%，酵母膏0.5%。

9.根据权利要求5或7所述的方法，其特征在于，所述的步骤（4）中，发酵底物中进一步加入相当于发酵底物重量4～6%的豆油，优选5%。

10.根据权利要求5或7所述的方法，其特征在于，所述的步骤（5）为：将接种了铜绿假单胞菌或丘陵假丝酵母发酵体系于30℃下，120～130rpm的恒温震荡培养箱中发酵165～170h。