[发明专利]一种正品半夏的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及正品半夏的检测方法，属于中药领域。 

背景技术

半夏来源于天南星科植物半夏Pinellia ternata（Thunb.）breit.的干燥块茎，呈类球形，有的稍偏斜少数为长远球形，直径1~1.5cm；表面白色或浅黄色，顶端有凹陷的茎痕，周围密布麻点状根痕；下面钝圆，较光滑；质坚实，断面洁白，富粉性，粉末嗅之呛鼻；气微，味辛辣、麻舌而刺喉。 

近几年半夏的市场需求量持续增加，野生资源逐年减少，人工栽培发展缓慢，使得半夏资源蕴藏量和产量都在大幅下降。导致市场上出现了很多伪品，给半夏药材的质量、用药的安全性及有效性带来了很大的冲击。 

通过对中药材市场的调研发现，半夏的伪品主要为水半夏、虎掌南星和禹白附。 

水半夏，为天南星科植物鞭檐的干燥块茎。呈近圆形、椭圆形、圆锥形或倒卵形，直径0.5~1.5cm，高0.8~3cm。表面类白色或淡黄色，不平滑，遍体隐约可见状根痕；上端类圆形，常用有偏斜而凸起的叶痕或芽痕，黄棕色，下端有点儿略尖。质坚实，断面白色，粉性。气微，味辛辣，麻舌而刺喉。 

虎掌南星，为天南星科植物掌叶半夏的干燥块茎。呈近球形，直径3~4cm，外皮粗糙，褐色，剥去外皮为类白色或淡棕黄色，顶端有深陷的茎痕，有的周边生有数个扁球状块茎，形如虎掌，气微，味辛辣。 

禹白附，为天南星科植物独角莲的干燥块茎。呈椭圆形或卵圆形，直径1~2cm，高2~5cm。表面白色或黄白色，略粗糙，有环纹及根痕，顶端具凹陷茎痕，下端钝圆。质坚硬，难折断，断面类白色，粉性。气微，味淡，嚼之麻辣刺舌。 

目前，正品半夏的有效检测方法是传统形态特征和理化特性的鉴别方法，其非常复杂并具有一定的局限性。 

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种正品半夏的检测方法。 

本发明正品半夏的检测方法，包括如下步骤： 

（1）取待检样品，加1~3倍重量的水，水温为0℃~5℃，匀浆，离心，得上清液； 

（2）用SDS-PAGE电泳方法检测步骤（1）的上清液，其在Rm值0.208、 0.232、0.312、0.335、0.383、0.405、0.429、0.491、0.615、0.85和/或0.897有谱带，所述电泳浓缩胶浓度为5%，分离胶浓度12%。 

其中，步骤（1）中，所述冰水重量为待检样品重量的2倍，所述离心为2000r/min离心2min。 

其中，步骤（2）中，所述上清液在Rm值0.208、0.232、0.312、0.335、0.383、0.405、0.429、0.491、0.615、0.85和0.897有谱带。 

SDS-PAGE电泳：十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳。 

Rm值：相对迁移率或者相对泳动率=蛋白绝对迁移距离/溴酚蓝迁移距离。 

其中，所述步骤（2）包括如下步骤： 

1）取上清液，加入0.1~1倍体积样品缓冲液，混匀，离心，得上样液，所述样品缓冲液是1mol/l Tris-盐酸缓冲液，并添加有0.15mol/l SDS和0.03mol/l溴酚蓝； 

2）取步骤1）的上样液上样，电泳，固定，染色，洗脱即可，所述电泳缓冲液为Tris-甘氨酸缓冲液。 

其中，步骤1）中，所述样品缓冲液为上清液的0.1倍；混匀后在沸水中加热3min；所述离心的条件是4000r/min离心离心30s。 

其中，步骤1）中，所述样品缓冲液还添加有20%（v/v）甘油和10%（v/v）β-巯基乙醇。 

其中，步骤2）中，所述固定采用的固定液为10%的三氯醋酸溶液；所述染色采用的染色液为考马氏亮蓝染色液；所述洗脱采用的洗脱液为考马氏亮蓝洗脱液。 

优选地，所述染色是用考马氏亮蓝染色液浸泡凝胶，50℃~60℃水浴加热15min，并不断振荡，放冷后倾去染色液。 

本发明方法可以准确检测正品半夏，准确度高，检测方法简单、快速，可以替代传统检测方法，具有良好的应用前景。 

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。 

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。 

附图说明