[发明专利]一种利拉鲁肽的固相合成方法

权利要求书

1.一种利拉鲁肽的固相合成方法，其特征在于，包括如下步骤：

选择Fmoc-Gly-Wang树脂，利用N端具有Fmoc保护和侧链保护的氨基酸为原料，按照利拉鲁肽直链的氨基酸序列从第二个精氨酸开始到第31个组氨酸逐步固相偶联氨基酸；26位上的赖氨酸采用的是Fmoc-Lys(Mtt)-OH或Fmoc-Lys(Mmt)-OH，N-末端的组氨酸采用的是Boc-His(Trt)-OH或Boc-His(Boc)-OH；

1%TFA选择性脱除26位赖氨酸上的Mtt或Mmt保护基； 

侧链上依次偶联g-谷氨酸和棕榈酸；

TFA切割树脂得到利拉鲁肽粗品，制备型液相纯化、冻干得到纯品。

2.如权利要求1所述的利拉鲁肽的制备方法，其特征在于：所述步骤1）中所述的固相载体树脂为取代度0.1-1.0mmol/g的Fmoc-Gly-Wang树脂。

3.如权利要求1所述的利拉鲁肽的制备方法，其特征在于：所述步骤1）中所述26位上的赖氨酸采用的是Fmoc-Lys(Mtt)-OH或Fmoc-Lys(Mmt)-OH，N-末端的组氨酸采用的是Boc-His(Trt)-OH或Boc-His(Boc)-OH。

4.如权利要求1所述的利拉鲁肽的制备方法，其特征在于：所述步骤1）中所述逐一偶联采用的缩合剂是HOBt/DIC或Cl-HOBt/DIC；每步的脱保护试剂为25%哌啶/DMF溶液。

5.如权利要求1所述的利拉鲁肽的制备方法，其特征在于：所述步骤2）中所述脱除赖氨酸上的Mtt/Mmt 保护基采用的脱保护试剂为1%TFA/5%Tis/DCM 。

6.如权利要求1所述的利拉鲁肽的制备方法，其特征在于：所述步骤3）中所述侧链上偶联g-谷氨酸为Fmoc-Glu-OtBu。

7.如权利要求1所述的利拉鲁肽的制备方法，其特征在于：所述步骤4）中所述加入切割树脂剂为：90%TFA/2.5%苯甲醚/2.5%苯酚/2.5%Tis/2.5%水。

8.如权利要求1所述的利拉鲁肽的制备方法，其特征在于：所述步骤4）中所述制备型液相纯化利拉鲁肽采用流动相A：乙腈（含0.1%TFA）；流动相B：水（含0.1%TFA），粗肽溶解于醋酸：乙腈：水（3:3:4）中，梯度洗脱；波长：220nm；收集产物峰，冷冻干燥得到纯品。