[发明专利]高效液相色谱法检测药物中残留有机溶剂的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种高效液相色谱法检测药物中残留有机溶剂的方法。

背景技术

N,N-二甲基甲酰胺（N，N-dimethyl formamide,DMF）是一种无色高沸点有机溶剂，其沸点为153℃。N,N-二甲基甲酰胺（DMF）能与水、乙醇、乙醚、醛、酮、酯、卤代烃和芳烃等混溶。其结构式为：

其分子式为：C₃H₇NO，分子量：73.10

N，N-二甲基乙酰胺（N,N-Dimethylacetamide，DMAC）是一种无色透明有机溶剂，其沸点为166℃。能与水、醇、醚、酯、苯、三氯甲烷和芳香化合物等有机溶剂任意混合。其结构式为：

其分子式为：C₄H₉NO，分子量：87.12

N-甲基吡咯烷酮（N-Methyl-2-Pyrrolidone，NMP）是一种无色透明油状液体，微有胺的气味，其沸点为203℃。能与水、醇、醚、酯、酮、卤代烃、芳烃和蓖麻油互溶。挥发度低，热稳定性、化学稳定性均佳，能随水蒸气挥发。有吸湿性。对光敏感。其结构式为：

其分子式为：C₅H₉NO，分子量：99.13

在药物合成过程中，DMF常常作为反应试剂或重结晶试剂；DMAC在医药和农药上大量用来合成抗菌素和农药杀虫剂；NMP是一种极性的非质子传递溶剂，广泛用于农药、医药和清洁剂等方面。在各国药典中药物中残留的DMF，DMAC和NMP均属于二类溶剂，是限制使用的，其残留限度分别是0.088％，0.109％和0.053％。

目前，药物中残留溶剂检测方法主要是顶空-气相色谱法。由于DMF，DMAC和NMP沸点高（分别是153℃，166℃和203℃），法规要求其残留限度低（分别是0.088％（880ppm），0.109%（1090ppm）和0.053％（530ppm）），用顶空气相色谱法常不能达到其检测灵敏度。因此，药典建议采用直接进样-气相色谱法检测这种高沸点溶剂DMF，DMAC和NMP，增大进样口温度，从而更好地气化DMF，DMAC和NMP，达到其检测灵敏度。但是，在实际操作中，直接进样-气相色谱法中，水相直接进样会对气相色谱仪及色谱柱造成不同程度的损害，对于水溶性药物，尤其是只能溶于水的药物，是不能采用直接进样-气相色谱法来进行检测，故水溶性药物中残留DMF，DMAC和NMP的检测成为难题。该现象亟待解决。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术中水溶性药物中残留N,N-二甲基甲酰胺（DMF），N-N-二甲基乙酰胺（DMAC）和N-甲基吡咯烷酮（NMP）的检测难度大，且可操作性不强的缺陷，提供一种利用高效液相色谱法（HPLC）检测药物中残留有机溶剂的方法，该方法能够精确检测水溶性药物中残留的N,N-二甲基甲酰胺（DMF），N-N-二甲基乙酰胺（DMAC）和N-甲基吡咯烷酮（NMP），方便快捷，灵敏度高，可检测低浓度样品，且准确度高。

高效液相色谱法（HPLC）是色谱法的重要分支，是以液体（不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等）为流动相，采用高压输液系统，将流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器（最常用的是紫外检测器）进行检测，从而实现对样品的分析。

现有技术中，没有用高效液相色谱法（HPLC）进行水溶性药物中残留的N,N-二甲基甲酰胺（DMF），N-N-二甲基乙酰胺（DMAC）和N-甲基吡咯烷酮（NMP）检测的方法。本发明的发明人，根据高效液相色谱法的上述性质，尝试选择适合的条件，进行药物中残留的N,N-二甲基甲酰胺（DMF），N-N-二甲基乙酰胺（DMAC）和N-甲基吡咯烷酮（NMP）的检测。该技术方案，填补了现有技术的空白，具有深远而重大的意义。

本发明的目的之一是，提供一种高效液相色谱法（HPLC）检测药物中残留有机溶剂的方法；

其步骤包括：将经过预处理的待测样品进行高效液相色谱法（HPLC）检测，即可；其中，所述的检测使用梯度洗脱的方法，流动相A为缓冲盐缓冲液，流动相B为乙腈；所述的缓冲盐为截止波长≤210nm的缓冲盐；

所述的梯度洗脱的条件为：以流动相A与流动相B的体积比为（90：10）~（98：2）洗脱5分钟；之后以流动相A与流动相B的体积比为（20：80）~（10：90）洗脱，或线性洗脱至流动相A与流动相B的体积比为（20：80）~（10：90）；洗脱至杂质除去，即可。