[发明专利]一种利用高效液相色谱法测定依托贝特有关物质的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种药物分析法，主要是指利用高效液相色谱法对依托贝特有关物质进行测定的方法。 

背景技术

依托贝特是由德国Merz公司研发的苯氧乙酸类和烟酸类血脂调节药，是安妥明和烟酸的复合物，服后在体内分解为安妥明和烟酸迅速产生作用，且作用持久，其特点是能抑制胆固醇和甘油三酯的合成，增加固醇类的排泄。临床主要用于降低血浆甘油三酯，用于治疗高血脂症（严重的原发性和继发性高血脂症），动脉搏粥样硬化，脑血管及末端血管障碍，血管及视网膜血管病变，预防中风、心脏病变、心肌梗塞、高血压、高血脂肥胖症、血液循环障碍等。 

依托贝特的化学结构式为： 

依托贝特的主要中间体杂质为它的降解产物烟酸、氯贝丁酸、氯贝丁酯，这些杂质的准确定量对于最终产品的质量控制是非常重要的。

本发明采用氰基柱快速准确实现了依托贝特有关物质的测定，实现了依托贝特、烟酸、氯贝丁酸、氯贝丁酯的有效分离，从而保证了依托贝特中间体杂质的可控，确保了依托贝特质量的可控性。 

发明内容

本发明的目的在于提供了一种利用高效液相方法测定依托贝特相关物质的方法，实现了对依托贝特的质量控制。 

本发明主要步骤为：称取依托贝特适量，用流动相溶解，配制成每1mL含依托贝特0.2~2mg的样品溶液，流速1.0mL/min，检测波长221nm，柱温25℃，取样品溶液20μL，注入高效液相色谱仪，完成依托贝特有关物质的测定。 

其中： 

高效液相色谱仪：岛津LC-20AT，SPD-20AT

色谱柱：氰基键合硅胶为填料的色谱柱，规格250mm×4.6mm，5μm

流动相：0.03mol/L磷酸二氢钾（用磷酸调至pH值3.8）：乙腈=55:45

流速：1.0mL/min

检测波长：221nm

柱温：室温

进样量：20μL

本发明能够将依托贝特以及各中间体降解产物烟酸、氯贝丁酸、氯贝丁酯有效分开，各降解产物之间的分离度均大于2.0，从而保证了各中间体杂质检出的准确性，本发明的测定方法具有简单快捷、专一性强、分析灵敏度高、结果准确可靠等优点。

  

四、附图说明

图1 依托贝特系统适用性HPLC图谱

图2 依托贝特有关物质HPLC图谱

图3 依托贝特酸破坏HPLC图谱

图4 依托贝特碱破坏HPLC图谱

图 5 依托贝特以及中间体杂质系统耐用性HPLC图谱

五、具体实施方式

以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围。

实施例1 

仪器与条件

高效液相色谱仪：岛津LC-20AT，SPD-20AT

色谱柱：氰基键合硅胶为填料的色谱柱，规格250mm×4.6mm，5μm

流动相：0.02mol/L磷酸二氢钾（用磷酸调至pH值3.8）：乙腈=55:50

流速：1.0mL/min

检测波长：221nm

柱温：室温

进样量：20uL

实验步骤

称取烟酸、氯贝丁酸、氯贝丁酯各25mg分别置于100mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀作为贮备液；另称取依托贝特25mg，置于50mL容量瓶中，分别取上述烟酸贮备液、氯贝丁酸贮备液、氯贝丁酯贮备液各1mL置于50mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，取供试品溶液，照上述条件进行高效液相分析，记录色谱图，HPLC图谱见附图1。

图1中保留时间为8.449min的色谱峰为依托贝特色谱峰，3.218min的色谱峰为烟酸的色谱峰，6.226min的色谱峰为氯贝丁酯的色谱峰，6.750min的色谱峰为氯贝丁酸的色谱峰。在上述条件下，依托贝特和中间体杂质分离良好，可以满足药典的要求。 

  

实施例2

仪器与条件

高效液相色谱仪：岛津LC-20AT，SPD-20AT

色谱柱：氰基键合硅胶为填料的色谱柱，规格250mm×4.6mm，5μm

流动相：0.03mol/L磷酸二氢钾（用磷酸调至pH值3.8）：乙腈=55:45

流速：1.0mL/min

检测波长：221nm

柱温：室温

进样量：20uL

实验步骤