[发明专利]一种双向伯克霍尔德氏菌及其培养方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于植物保护（微生物农药）领域，具体涉及一种双向伯克霍尔德氏菌及其培养方法和应用。

背景技术

植物病原菌（包括真菌、细菌、病毒等）引起的植物病害给农业生产造成了重大的经济损失。目前，防治水稻、香蕉等重要植物病害的主要方法是使用杀菌剂。但是杀菌剂的大量使用具有增加病原菌抗药性的风险，并且会对环境造成严重的污染，对人畜健康也构成威胁，而生物防治是一种对环境友善的防治植物病害的新途径。

植物周围不仅存在病原菌，还存在着大量的非病原菌，其中有的还是病原菌的拮抗微生物。这些拮抗微生物可通过与病原菌的抗生作用、竞争作用、重寄生作用及诱导植物产生系统抗性等机理来抑制病原菌，达到防治植物病害的目的。此外，拮抗微生物对环境安全，不像化学农药那样会造成环境污染以及对人畜的毒害，同时拮抗微生物不易使病原菌产生耐药性，有些还具有促进植物生长的作用，且实际生产工艺简单。因此，利用拮抗微生物来防治植物病害的研究越来越受到国内外的重视。目前，人们已经分离到多种对各种不同植物病害有不同程度防治效果的拮抗微生物，其中有些已经进入实际应用阶段，产生了相当可观的社会效益和环境效益。

目前对伯克霍尔德氏菌属（Burkholderia）的研究已较多，主要集中在应用该属内的菌株产生酶或用于治理环境污染，如以下专利文献：公开号1195373（日本，中山美香等，公开日2004/03/24）的降解卤代烃的微生物及应用；公开号1484703（日本，早出广司，公开日2004/03/24）的葡萄糖脱氢酶和生产该脱氢酶的方法；公开号1867676（日本，山口将宪等，公开日2006/11/22）的鲨肌醇的制备方法；公开号101198695（德国，贝赛林等，公开日2008/06/11）的生产脂肪酶的方法；公开号101153272（中国，盛下放等，公开日2008/04/02）的一种铅镉抗性细菌及其用于土壤重金属污染的植物修复方法；公开号102046778A（日本，古贺一治、增田绅吾，公开日2011/05/04）的降低植物体中的重金属含量的细菌；公开号101671636（中国，郭军康等，公开日2010/03/17）的一种抗重金属植物促生菌制剂及其施用方法。但以上文献都没有涉及到植物病原菌生物防治的相关应用。

在植物病害的生物防治方面，任嘉红等发现吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007对杨树溃疡病具有防治效果（任嘉红等，吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007抗菌蛋白的分离纯化，微生物学通报，2010-06-20；任嘉红等，吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007的发酵条件及其对杨树溃疡病的防治效果，中国生物防治，2010-08-08；叶建仁等，一种吡咯伯克霍尔德氏菌及其在防治杨树溃疡病中的应用，中国专利，2009-10-14；）；查传勇发现双向伯克霍尔德氏菌Lu10-1能够产生抗菌活性物质（查传勇等，双向伯克霍尔德氏菌Lu10-1产生抗菌活性物质的发酵培养基和发酵条件优化，蚕业科学，2009-06-15）；林善海等发现伯克霍尔德氏菌对香蕉褐缘灰斑病具有防治效果（林善海等，拮抗伯克霍尔德氏菌对香蕉褐缘灰斑病的生物防治试验，中国植物病理学会2007年学术年会论文集，2007-08-01）。

虽然目前研究已表明伯克霍尔德氏菌可用于拮抗某些植物病原菌，但是筛选、鉴定对植物病原菌抑制作用显著的拮抗微生物，以及对该种微生物进行大规模培养和应用仍是十分必要的。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术中各种植物病原真菌和细菌引起的植物病害化学药剂防治副作用大、生物防治药物缺乏的缺陷，提供一种可抑制包括香蕉炭疽病菌和水稻纹枯病菌在内的多种植物病原菌的广谱生防菌株。

本发明通过以下技术方案实现上述目的：

一种双向伯克霍尔德氏菌，分类命名为：双向伯克霍尔德氏菌Burkholderia cepacia，于2011年10月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号 CGCC No.5384。该菌株的16S rDNA序列如SEQ ID NO:1所示。

本发明还提供了一种生物菌剂，该生物菌剂含有上述双向伯克霍尔德氏菌或含有上述双向伯克霍尔德氏菌发酵液（即培养液）经过滤后的无菌滤液，所述无菌滤液优选用上述双向伯克霍尔德氏菌培养液经过离心取得的上清再经过细菌过滤器过滤获得。