[发明专利]一种南美蟛蜞菊体外快繁的两步法

权利要求书

1.一种南美蟛蜞菊体外快繁的两步法，其特征在于按照下述步骤进行：

(1)  取南美蟛蜞菊长势较好的无病虫害的叶片用蒸馏水冲洗干净，用体积比75%乙醇擦拭叶片，再用蒸馏水冲洗3-5次，置于无菌操作台上；

(2)  用体积比70%-75%乙醇浸泡1 min，并不断地摇动，后倒掉乙醇，加入体积比0.1%(v/v)的升汞HgCl₂浸泡6-8 min，倒掉升汞，灭菌蒸馏水冲洗3-5次，置于无菌培养皿中；

(3)  用剪刀将叶片边缘剪掉，将叶片剪成长1 cm左右的长方形，叶背向下接种于不定根诱导的培养基上，并将切口紧贴培养基，每个培养皿接种3-4片叶片，培养皿封口后，置于光照培养箱中进行不定根的诱导，培养温度24℃，光照周期16/8 h，湿度70%；

(4)  5-6 d后叶边缘及叶脉开始生长少量的愈伤组织，8-10 d 颗粒状的愈伤组织上开始产生不定根，取生长不定根的紧密的愈伤组织转移到不定芽分化培养基上进行不定芽的诱导；

(5)  5-10 d 左右产生丛生芽，10-15 d得到完整的南美蟛蜞菊植株。

2.根据权利要求1所述的一种南美蟛蜞菊体外快繁的两步法，其特征在于其中步骤(3)中诱导不定根培养基配方为1L的MS培养基中含有8-15 mg的NAA。

3. 根据权利要求1所述的一种南美蟛蜞菊体外快繁的两步法，其特征在于其中步骤(4)中不定芽分化培养基配方为1L的MS培养基中含有2-5 mg的6-BA, 0.1-0.5 mg 的IAA和800-1200 mg的脯氨酸。