[发明专利]一种高效提取香菇多糖的新方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物有效成分提取的领域，具体地涉及一种香菇多糖的提取和纯化方法。

技术背景

香菇[Lentinus edodes(Berk.)Sing]又名香覃、厚菇，为担子菌纲伞形科真菌，素有“山珍之王”之称，集食用、药用于一身，是高蛋白、低脂肪的营养保健食品。早在《本草纲目》中就有记载，香菇“性平、味甘，能益气不饥，治风破血，化痰理气，益味助食，理小便不禁”。

香菇多糖(lentinan，简称LNT)是香菇中提取的一种重要的有效药用组分，是一种以D-(1→3)葡萄糖残基为主链、(1→6)葡萄糖残基为侧链的葡聚糖。自从1969年Chihara等首次用热水从香菇子实体中提取纯化出香菇多糖并确认其具有明显的抗肿瘤作用(Chihara et al，inhibition of mouse sarcoma 180by polysaccharides from lentinus edodes(Berk.)Sing，Nature，1969，222：687-688)以来，大量研究工作表明香菇多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、调节免疫、抗炎症等功能，并能减轻放疗和化疗的毒副作用，提高患者的生活质量和延长存活时间。由于香菇多糖的医学功效广泛且几乎没有任何副作用，因而被认为是继手术、放疗、化疗之后的第4种生物免疫疗法。

现有的香菇多糖提取工艺主要包括：传统热水浸提法、稀酸(碱)浸提法、酶解提取、超声波辅助浸提法、酶法等(例如参见李珺等，香菇多糖的分离纯化方法研究进展，《北方园艺》，2008(12)：84-85；刘树兴等，香菇多糖提取工艺的研究，《西北轻工业学院学报》，2002，20(2)：23-25；CN 101851356A；CN1153179A，等)。然而，这些方法都存在着周期长、提取率不高、有效成分损耗较大等缺点。

为了克服现有技术的上述缺点和不足，本发明的发明人研究出了一种新型的香菇多糖提取工艺，其中采用亚临界流体提(Sub-critical fluid extraction，SFE)技术。亚临界水又称超加热水、高压热水或热液态水，是指在一定的压力下将水加热到100℃以上临界温度374℃以下的高温仍然保持液体状态的水体。常温常压下水的极性较强，而在亚临界状态下微观结构的氢键、离子水合、离子缔合、簇状结构等理化性质发生了变化，使水的极性大大降低，这样就可以通过控制亚临界水的温度和压力，使水的极性在较大范围内变化，从而将溶质按照极性由高到低提取出来，实现天然产物中有效成分从水溶性成分到脂溶性成分的连续提取，同时可实现选择性提取(例如参见郭娟等，亚临界水萃取技术在天然产物提取中的研究进展，《现代化工》，2007(12)：19-24，等)。这种提取方法大大缩短了提取周期，最大程度地保留了有效成分的活性，并能显著提高提取效率。此外，由于亚临界水提取是以价廉、无污染的水作为提取剂，因此与其他提取方法相比具有无毒无害、节能环保的优势，应用前景广阔。

发明内容

本发明的目的是提供一种工艺简单、成本低、绿色环保的香菇多糖提取和纯化方法。

本发明的香菇多糖提取和纯化方法是以香菇为原料，采用处于亚临界状态的流体作为提取剂，提取出香菇粗多糖组分，再对所得粗多糖组分进行纯化，制备得到精制香菇多糖。

根据本发明的一个实施方案，所述原料可以是香菇的子实体或柄。

根据本发明的一个实施方案，所述处于亚临界状态的流体可以是亚临界水或亚临界稀碱溶液，所述稀碱溶液例如0.1～0.6mol/L的氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液。

根据本发明的一个实施方案，所述香菇粗多糖组分的提取工艺如下：

1)原材料预处理：取干燥后的香菇子实体或香菇柄，清洗除去其中的可见杂物后，用粉碎机粉碎，过40目筛备用；

2)亚临界水提：将步骤1)的香菇干粉置于提取罐中，加入20～30倍重量的水或稀碱溶液，在140～180℃的亚临界水温下浸提4～8分钟，重复浸提2～4次；

3)超滤浓缩：将步骤2)的浸提液用滤布过滤，并使用截留分子量为50,000Da的超滤膜对浸提液进行浓缩，至滤液重量为香菇粉重量的1.5～2.5倍为止；

4)乙醇沉淀：在步骤3)的滤液中加入5倍重量的预先冷却至4～8℃的乙醇(纯度为80％以上)，搅拌均匀，在4～8℃下静置24小时，接着4000r/min离心收集沉淀，从上清液中回收乙醇以循环使用；