[发明专利]有关胚胎移植延迟和使用外周血单核细胞的体外受精方法

说明书

关于联邦资助研究或开发的声明

本发明的开发没有使用任何联邦资金，并且是由下列发明人独自开发的。

在先申请

本申请要求于2012年10月18日提交的在先提交的美国专利申请号13/655,257的权益，所述专利申请要求于2011年11月23日提交的在先提交的美国临时专利申请号61/629,651的权益，所述申请的主题以全文引用的方式并入本文。

技术领域

本发明涉及体外受精领域，特别是对于由于自身免疫反应而使生育力降低的妇女。本发明公开了一种通过将体外授精技术任选地与延长她们的卵母细胞或IVF-产生的胚胎的冷冻保存相结合、并且与在胚胎移植前借助于外周血单核细胞(PBMC)对子宫中的子宫内膜进行受控准备相结合来提高妊娠植入的植入率和稳定性的方法。

发明背景

据世界卫生组织报告，全世界每年有超过15％的妇女经历妊娠困难并且寻求医学帮助(WHO1997)，估计十年前全世界范围内有六千万到八千万的妇女。世界卫生组织把任意的十二个月期间之后没有怀孕作为对不孕的一般定义。然而，许多夫妻在多年尝试自然受孕未果之后才寻求医学帮助以试图怀孕。生育率的降低与医学和非医学因素有关。例如，已表明妇女的年龄是怀孕所需要的平均时间的主要直接决定因素。已表明有1:1000的妇女在30岁前发生卵巢功能早衰，1:250的妇女在35岁时发生卵巢功能早衰以及1:100的妇女在40岁时发生卵巢功能早衰。因而，最高的出生率是在25岁到30岁的年龄组并且在35岁之后迅速下降。不孕是当前年龄在25岁到45岁的人群所面对的最常见的健康问题。因此，对能够延长健康妇女的生育力从而可能避开生育的年龄相关障碍的方法以及对于通过自然方法不能受孕的妇女来说延长生育力的方法存在着极大的关注和需要。尽管不孕本身可能不会威胁身体健康，但是它经常对妇女和夫妻的情感、心理以及精神健康产生严重的影响。

辅助生殖技术是涉及以在雌性受试者体内建立妊娠为目的对人卵子(卵母细胞或卵细胞)和精子(精细胞)两者以及对胚胎进行体外处理的程序。这些程序包括但不限于包括胚胎移植的体外受精(“IVF”)、输卵管内配子移植、输卵管内受精卵移植、输卵管胚胎移植、配子和胚胎冷冻保存和卵母细胞及胚胎捐献以及妊娠代孕。当其它辅助生殖技术方法已经失败时，体外受精(“IVF”)已经发展成为不孕或低生育力的主要治疗方法。在最基本的意义上，所述过程涉及从妇女体内取出雌性卵子和在体外用精子使所述卵子受精(“体外”)。所述过程涉及监测妇女的排卵过程、从所述妇女卵巢内移出多个卵子以及在实验室内的流动介质中让精子使所述卵子受精。所述卵子一般是通过包括在超声指导下以针穿刺阴道壁以达到卵巢的经阴道卵母细胞撷取从患者撷取的。通过这个针，可以对卵泡进行抽吸，并且将卵泡液送到IVF实验室以鉴定和诊断卵细胞。通常从每个患者取出10到30个卵子。随后将受精卵、(胚胎)、或一般多个胚胎移植到患者的子宫内以试图建立成功的妊娠。例如：参见美国专利号7,781,207。

体外受精的首次开发是在20世纪70年代，迄今为止已经为很大一部分妇女提供了有效形式的帮助。当前据报道，IVF占了欧洲所有活产的1.3％[Nygren等，2001]以及澳大利亚所有活产的1.7％[Hurst等，2001]。在美国，辅助生殖技术IVF周期从2006年开始，已经有41,343例出生(54,656名婴儿)，稍多于那一年美国出生总数的1.0％。在2010年，Robert Edwards因为体外受精的开发而被授予诺贝尔生理学和医学奖。接下来的步骤是Carl Wood首创的，能够冷冻以及依次解冻和移植胚胎，这显著地提高了IVF治疗的可行性。

根据大量的报道研究，先前的体外受精技术所获得的典型的成功妊娠率仍然相对较低，在15％到25％的范围内。健康护理专业人员广泛公认，受精最重要的限制因素是胚胎不能植入到子宫的内衬子宫内膜中。Blake等报道80％到85％的胚胎在移植到IVF患者体内之后不能引起怀孕，导致胚胎巨大浪费。Simon等证明在正经历IVF周期的妇女中，在60％的周期中检测到植入，因此在IVF的所有移植胚胎中，40％植入失败。