[发明专利]基于IL-15和IL-15Rα SUSHI结构域的免疫细胞因子

说明书

本国际专利申请要求2011年6月24日提交的欧洲专利申请11358005.4的优先权，其通过引用合并于此。

发明领域

本发明涉及新的免疫细胞因子（immunocytokine）及其作为药物，特别是用于治疗癌症的药物的用途。

背景技术

免疫疗法在医学中指一系列基于调节免疫系统以实现预防和/或治疗目标的原理的治疗策略。

在过去几年中，免疫疗法已被用于治疗或预防一些病变，特别是癌症。由于用于产生单克隆抗体的细胞融合技术的发展，研究人员已经生产了大量单克隆抗体。此后，开发了产生单克隆抗体的其它技术，包括产生人单克隆抗体的B细胞杂交瘤技术和EBV杂交瘤技术。

单克隆抗体（Mab）可以开发为靶向几乎任何抗原决定簇。特异性识别和结合特定细胞/分子的性质促进Mab开发为用于各种疾病状态的诊断剂和治疗剂。DNA重组技术已用于产生嵌合抗体或人源化抗体，以适应其给药于人类。目前，对于癌症、传染病、免疫性疾病等的治疗，一些单克隆抗体是市销且可获得的，比如

单克隆抗体是定向的分子，能够定位于特定区域（细胞、组织），例如肿瘤组织之内。在靶向称为肿瘤抗原的肿瘤部位中的特定分子的尝试中，该性质也导致产生结合到各种物质（有效载荷，payload）的Mab的开发。此类物质（有效载荷）可以为毒素、药物、放射性核素、前药化合物等。这些连接中许多涉及反应性部分（有效载荷）与给定抗体制品的化学结合，其可能是缓慢复杂的并经历变化的过程（US4,671,958）。

在这些新分子中，免疫细胞因子是特别令人感兴趣的。所述免疫细胞因子相当于包括抗体和细胞因子的融合蛋白。这些蛋白质同时保持抗原结合力和细胞因子活性。

细胞因子是一类在细胞通信中广泛使用的信号传导蛋白和糖蛋白，如激素和神经递质。虽然激素是由特定器官分泌到血液中，并且神经递质与神经活性有关，但是细胞因子为在其来源和用途方面更多样化类型的化合物。它们由多种造血细胞和非造血细胞类型产生，并可对邻近细胞或整个生物体都有作用，有时强烈地依赖于其它化学品的存在。细胞因子家族主要由质量为8至30kDa之间的较小的水溶性蛋白和糖蛋白组成。细胞因子对于天然免疫应答和适应性免疫应答的功能都重要。通常由已经遇到病原体的免疫细胞分泌，以作为活化和募集更多免疫细胞并增加系统对病原体反应的方式。然而，除了它们在免疫系统的发育和功能化中的作用，细胞因子还参与胚胎发生期间的一些发育过程。

在细胞因子中，白细胞介素15（IL-15）是一种具有与IL-2类似的结构的细胞因子，白细胞介素15是被病毒感染或被识别为非自身或虚弱的（debilitated）细胞间接刺激之后由单核吞噬细胞（和一些其它细胞）分泌的。该细胞因子诱导自然杀伤细胞的细胞增殖；自然杀伤细胞是主要作用为杀死病毒感染的细胞的固有先天免疫系统的细胞。由该基因编码的蛋白是调节T细胞和天然杀伤细胞活化和增殖的细胞因子。

因此，基于IL-15的免疫细胞因子的构建对于肿瘤特异性抗体的肿瘤靶向益处与白细胞介素15的免疫调节作用的组合有特别的意义。已经获得特别地使用白细胞介素-2（IL-2）的一些免疫细胞因子，并且在2期肿瘤学临床试验中证实了非常令人感兴趣和令人鼓舞的结果。这些融合蛋白的一些实施例描述在一些专利申请（US5,645,835、EP0,305,967、WO86/01533、EP0,439,095和WO85/00974）中说明。

因此，已经在HEK-293中产生了基于白细胞介素-15的免疫细胞因子，并在国际专利申请PCT WO2007/128563和KASPAR等的（Cancer Research,vol.67(10),p:4940-4948,2007）中公开。

然而，本发明人证实此类基于白细胞介素15的免疫细胞因子具有非常有限的白细胞介素15活性，并且在CHO细胞中特别地非常难于制备，产率低且具有许多蛋白污染物。

因此，仍然需要可以在免疫疗法中使用的基于白细胞介素15的免疫细胞因子。

发明简述

本发明涉及免疫细胞因子，所述免疫细胞因子包括：

a）缀合物，和

b）直接地或间接地共价连接至所述缀合物的抗体或所述抗体的片段，

其中，所述缀合物包括：