[发明专利]稳定的DOTAP氯化物晶体变体

说明书

本发明涉及外消旋和对映体纯的DOTAP氯化物晶体变体，涉及其制备方法，以及涉及其用于制备药物组合物的用途。

DOTAP氯化物的晶体形式和相应的药物组合物具有与DOTAP氯化物的非晶体形式的用途相同的熟知用途。

上下文所述的DOTAP氯化物是指N,N,N-三甲基-2,3-双[[(9Z)-1-氧杂-9-十八烯]氧基]-1-丙铵氯化物，也被称为(Z,Z)-N,N,N-三甲基-2,3-双[(1-氧杂-9-十八烯]氧基]-1-丙铵氯化物或1,2-二油酰氧基-3-三甲基铵丙烷氯化物的外消旋体(2R,S)-或同分异构体纯的(2R)-和（resp.）(2S)-的构型，以及其水合物。

C₄₂H₈₀ClNO₄,       M_W698.54

CAS登记号：132172-61-3和477274-39-8（外消旋体），

197974-73-58（外消旋体，一水合物）

428506-51-8（2S构型），328250-28-8（2R构型）

除了其它，DOTAP可以构建脂质体和其它脂质囊泡聚集体。脂质体是包含两性物质、通常是天然脂质的合成的多层囊泡（球形自容纳膜），其中亲水性物质均可以被包封在其含水的内部，并且亲脂性物质可以被包含在其脂质膜的内部。

它们特别用于化妆品和药品中，尤其是在皮肤病学中。在此，特别是维生素、辅酶、皮肤护理剂和防晒剂包含在其中。脂质体通常是局部施用。

此外，既然与如果以游离的溶解形式使用活性化合物相比，脂质体的胃肠道外应用能够实现更特定的器官分布，因此在制药技术中脂质体正不断获得更多的重视。

如果将DNA、RNA或蛋白质结合到脂质体以及其它脂质囊泡聚集体中，就得到脂质体复合物（lipoplexes）。

加入油和使用高压匀浆机能够由脂质体强行形成所谓的纳米颗粒（nanopart）。这些是与脂质体尺寸大约相同的颗粒，但其不具有水相，而是具有油相在其内部。它们特别适合于亲脂性物质的包封。

微乳液是包含含水的脂质样表面活性剂组分的胶体分散的单相体系。它们的颗粒尺寸为1-500nm并且表现出与液体类似的形式。

特别地，就溶解性通常差的肽类活性化合物、核苷酸、疫苗和其它生物药物而言，在上述应用的情况下，增溶效果非常重要。

此外，活性化合物的体内降解可以被减缓，并且以该方式实现持续释放效果。

DOTAP氯化物属于阳离子脂质类。与天然存在的磷脂相反，其不具有两性离子特性。单独的或与磷脂或其它脂质样化合物结合的包含阳离子脂质的脂质体具有正电表面。这样对外表面上具有负电的细胞，例如内皮细胞产生强亲和力。

然而，以DOTAP为基础以及其它阳离子脂质体和脂质体复合物透入细胞以及由此将其中结合的活性化合物运送至细胞内部（转染）的能力是特别重要的。

对于癌症治疗而言，所有这些性质使得DOTAP氯化物也非常值得关注。这些性质使应用结合到DOTAP阳离子脂质体中的常规细胞生长抑制剂成为可能。

根据文献充分了解DOTAP氯化物和其它DOTAP盐例如乙酸盐、溴化物、磷酸二氢盐、硫酸氢盐、碘化物、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、三氟乙酸盐、硫酸盐或硫酸氢盐和三氟甲磺酸盐的转染性质。

在一些体外研究中，其它盐例如DOTAP甲基硫酸盐已经取得了比DOTAP氯化物更优的转染率。

然而，在体内使用时，在活体中在脂质体表面处发生阴离子交换，意味着这时其它盐的优势不存在。特别是在人的医疗用途中，特别是对于胃肠道外应用，具有生理上可接受的阴离子例如相应的氯化物或乙酸盐的DOTAP盐是优选的。

医疗特别是胃肠道外应用对使用的活性化合物和佐剂的质量和纯度提出最高要求。因此，就这些化合物的制备、重复制备和副产物情况，官方部门有非常严格规定。此外，在胃肠道外使用物质的情况下，病原微生物和内毒素的微生物污染必须严格地避免和控制。

目前可以得到的无定形形式的DOTAP氯化物和其它DOTAP盐非常不稳定并且因此本身难以以可接受的纯度制备，以使得它们适合用于制备药物制剂。

像所有带有油酸基团的脂质，例如天然的磷脂DOPC和DOPE一样，所有的DOTAP盐对氧化非常敏感，并且不饱和脂肪酸衍生物的氧化产物一般具有强毒性。

在此，需要适合的制备、纯化和稳定化的方法。例如，DOTAP乙酸盐为高沸点油的形式并且因此工业上仅可能非常困难地获得优等质量的DOTAP乙酸盐。