[发明专利]溶瘤作用中的禽偏肺病毒

说明书

本发明涉及用于治疗的禽偏肺病毒(AMPV)和用于治疗的包含禽偏肺病毒(AMPV)的药物组合物。

已知某些病毒可以根除肿瘤已有几十年。通常已知此类病毒为溶瘤病毒。尽管可溶瘤的肿瘤数相对低，但在几种病毒属中发现了它们。尤其是以下属的溶瘤成员是已知的：腺病毒、疱疹病毒、多瘤病毒、痘病毒、细小病毒、呼肠孤病毒、正黏液病毒、副黏液病毒、弹状病毒、冠状病毒、小核糖核酸病毒、披膜病毒和逆转录病毒。Vaha-Koskela, M.等近期的小综述给出了溶瘤病毒在癌症治疗中的概述(Cancer Letters 254: 178-216 (2007))。

所有溶瘤病毒均要面对的问题是在第一次剂量施用后，针对所用病毒的免疫开始建立。而且，考虑到肿瘤细胞中不可预知的分化和去分化途径，很可能某一肿瘤块的某些个别肿瘤细胞对癌症治疗中所用的溶瘤病毒变得具有抗性。例如，这可能是由于此类肿瘤细胞丧失了对该溶瘤病毒的受体这一事实。

如果仅由于这些原因，则存在对新溶瘤病毒的需要，其可以在开始癌症治疗时使用或当其他溶瘤病毒在癌症治疗中没有效果时用作替代物。

目前令人惊奇地发现，活禽病毒(火鸡鼻气管炎病毒，目前也已知为禽偏肺病毒(AMPV))出人意料地在哺乳动物细胞中具有溶瘤作用。

火鸡鼻气管炎(TRT)病毒或禽偏肺病毒是副黏液病毒科病毒科中偏肺病毒属的成员。偏肺病毒具有反义极性的单链非分段RNA基因组。

在副黏液病毒科中，直至目前，已知四个属的病毒包括一种溶瘤成员：禽腮腺炎病毒属中的一个成员(新城疫病毒)、麻疹病毒属中的一个(具体麻疹毒株)、呼吸道病毒属中的一个(仙台病毒)和德国麻疹病毒属中的一个(腮腺炎病毒)。

直至目前，仍不知道或者怀疑副黏液病毒科的偏肺病毒属具有显示出溶瘤特性的成员。

偏肺病毒属具有两个成员，其中之一是上述的AMPV，另一个成员是人偏肺病毒(HMPV)。两种病毒均导致呼吸道疾病；在人中为HMPV以及在家禽中为AMPV。

正是偏肺病毒的融合蛋白(F)负责向性中的差异。De Graaf等已经令人信服地显示HMPV不能感染家禽。并且反之亦然，从未报道AMPV在哺乳动物中导致疾病或甚至任何临床症状。(De Graaf M.,等, J. Gen. Virol. 90:1408-1416 (2009))。

此外，无论是HMPV或AMPV，均未描述任何抗肿瘤作用。

在同样剂量下，活AMPV选择性杀死哺乳动物肿瘤细胞而非哺乳动物正常分化细胞和哺乳动物正常增殖细胞。选择性杀死哺乳动物肿瘤细胞这一特征将进一步称为抗肿瘤作用。

抗肿瘤作用表示无论作用方式如何，肿瘤的个别细胞由病毒杀死。例如，由于病毒裂解这些细胞，因此它们可以对细胞具有抗肿瘤作用：认为裂解病毒株破坏受感染细胞的质膜。抗肿瘤作用的另一形式例如见于非裂解病毒；它们似乎干扰细胞的代谢并且由于该作用方式而导致细胞死亡。

AMPV的抗肿瘤作用使病毒非常适合用于癌症治疗。

因此，本发明的第一个实施方案涉及用于哺乳动物中癌症治疗的活禽偏肺病毒(AMPV)。

优选地，AMPV用于针对乳腺癌、肺癌、前列腺癌、成胶质细胞瘤、纤维肉瘤、卵巢癌、子宫颈癌、膀胱癌或结肠癌、或针对黑素瘤的癌症治疗。

更优选地，AMPV用于针对结肠癌的癌症治疗。

为了具有抗肿瘤作用，AMP病毒必须以对肿瘤细胞具有细胞毒性的量来施用。该量称为细胞毒性量。因此，AMPV的细胞毒性量是诱导肿瘤细胞死亡所必需的病毒的量。

理论上说，一个AMPV可以感染并杀死一个肿瘤细胞。因此对于诱导肿瘤细胞死亡所必需的AMPV的细胞毒性量将为每个细胞一个病毒。

然而，在实际环境中，技术人员将施用是待感染的肿瘤细胞数的多倍的量。

尽管如此，将需要非常少量的病毒以诱导抗肿瘤作用。每剂量10³个蚀斑形成单位(pfu)的病毒数已经足以攻击少量的肿瘤细胞。因此，对于许多实践目的，低至10³ pfu个病毒的数目已经能够认为是细胞毒性量。

然而，将清楚的是，如果施用的病毒量太少以致于仅少量肿瘤细胞被感染，则在第一轮感染已经产生了能够感染进一步的肿瘤细胞的新的子代病毒之前，会过去一些时间。对于后续的复制轮次同样是这样，并且同时将建立针对病毒的免疫应答并干扰病毒。因此，优选一次施用更高数量的病毒。在那种情况下，许多肿瘤细胞将同时获得感染，并且因此许多肿瘤细胞将在建立针对病毒的免疫之前获得感染。