[实用新型]免疫用抗原乳化装置

说明书

技术领域

本实用新型涉及医疗器械领域，特别涉及一种免疫用抗原乳化装置。

背景技术

动物免疫是制备单抗或多抗血清的关键环节之一。为了获得高效价的抗体，在免疫动物时通常需要使用佐剂。佐剂又称免疫调节剂或免疫增强剂，是指先于抗原或与抗原混合或同时注入动物体内，能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答，发挥辅助作用的一类物质。佐剂本身可以有免疫原性，也可以没有免疫原性。通过应用佐剂可以提高抗原对机体的免疫原性，从而提高抗体的效价。由于颗粒性抗原（如细菌、细胞）具有较强的免疫原性，一般情况下不使用佐剂即可取得较好的免疫效果。对于可溶性大分子量的蛋白质免疫原、人工抗原，初次免疫时必须使用佐剂才能取得较好的免疫效果。免疫佐剂的作用主要有：1、延缓抗原的释放，保护抗原不被水解，佐剂可延长抗原在体内滞留时间，避免频繁注射，有利于高亲和力抗体的产生；2、活化巨噬细胞并促进巨噬细胞与T和B细胞的相互作用，从而对淋巴细胞有特异性加强刺激的作用；3、佐剂吸附了抗原后，增加了抗原的表面积，使抗原易于被巨噬细胞吞噬；4、佐剂能刺激吞噬细胞对抗原的处理；5、可刺激致敏淋巴细胞的分裂和浆细胞产生抗体。故免疫佐剂的作用可使无免疫原性物质变成有效的免疫原；6、可提高机体初次和再次免疫应答的抗体滴变；7、改变抗体的产生类型以及产生迟发型变态反应，并使其增强。佐剂种类很多，目前尚无统一的分类方法，常用的佐剂可分为四类：无机佐剂，如氢氧化铝，明矾等；有机佐剂，微生物及其产物，如分枝杆菌（结核杆菌、卡介苗）、短小杆菌、百日咳杆菌、内毒素、细菌提取物（胞壁酰二肽）等；合成佐剂，如人工合成的双链多聚核苷酸（双链多聚腺苷酸、尿苷酸）、左旋咪唑、异丙肌苷等；油剂，如费氏佐剂、花生油乳化佐剂、矿物油、植物油等。

目前在实验动物中最常用的是弗氏佐剂，弗氏佐剂又可分为弗氏不完全佐剂和完全佐剂两种。免疫动物前，需要将弗氏佐剂与水溶性抗原乳化，以形成稳定的油包水乳剂。常用方法主要包括：1、研磨法：先将佐剂加热并取适量放入无菌的玻璃研钵内，待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液，边滴边按同一方向研磨，滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后，继续研磨一段时间，使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。这种方法适于制备大量的佐剂抗原，缺点是研钵壁上粘附大量乳剂，抗原损失较大。2、注射器混合法：将等量的弗氏佐剂和抗原溶液分别吸入两个注射器内，两注射器之间以一细胶管相连，注意排净空气，然后交替推动针管，直至形成粘稠的乳剂为止。鉴定方法是将乳化剂滴入冷水中，若保持完整不分散，成滴状浮于水面，即乳化完全，为合格的油包水剂。这种方法的优点是容易做到无菌操作，抗原损失少，适用于制备少量的抗原乳剂，但同时难以乳化完全，个别抗原，用塑料注射器根本推不动，而用玻璃注射器又有渗漏，制备好的乳化剂经鉴定才能适用。3、超声混合法：将抗原和佐剂按所需量加入一离心管中，置于超声波粉碎器上，粉碎头浸入液面下0.5厘米，离瓶底0.5厘米左右，以免打碎离心管；控制超声频率和时间，每次乳化10秒~15秒，然后置冰箱l分钟左右；反复乳化3c次~4次即可完全乳化。这种方法的优点是简单、快速、节省材料，但是超声容易激发一些自由基，对抗原有未知损害。因此，以上方法都不同程度地存在缺憾，难以满足实验工作的需要。目前，常用的佐剂是弗氏佐剂（Freund adjuvant,FA），包括完全弗氏佐剂（Complete freund adjuvant,CFA）和不完全弗氏佐剂（Incomplete freund adjuvant,IFA）。免疫动物前，需要将弗氏佐剂与水溶性抗原乳化，以形成稳定的油包水乳剂。乳化效果的好坏是获得高效价抗体的关键。然而，传统的乳剂制备法费时费力，不能适应实验的需要。