[实用新型]一种胃蛋白酶原Ⅰ光激发化学发光检测试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种血清（血浆）中胃蛋白酶原Ⅰ检测试剂盒，属于体外试剂诊断领域中血清（浆）抗原检测方法，运用了光激发化学发光技术，用于实施疾病诊断和治疗方法的仪器或装置，属于光激发化学发光免疫分析技术领域。

背景技术

胃蛋白酶原Ⅰ（简称PGⅠ）是反映胃部状态的功能性指标——胃蛋白酶无活性前体，PGⅠ由胃底腺的主细胞、颈黏液细胞分泌，大部分进入胃腔，少量进入血液循环，而胃是PGⅠ的唯一来源，因此PGⅠ水平的变化可以反映胃粘膜状态和细胞数量的改变。

国内外临床研究指出，PGⅠ升高，提示胃黏膜破损可能性高，患胃溃疡、胃炎的风险增加；PGⅠ降低，则患有萎缩性胃炎的可能性明显增加，甚至有患胃癌的风险。测定PGⅠ含量有助检测出胃溃疡、萎缩性胃炎、胃炎、胃癌等其他消化道疾病，供临床检测和体检筛查需求。

国内外学者对胃癌患者的血清PG变化作了大量研究指出：胃癌患者的血清PG含量急剧降低，低分化癌患者PGⅠ含量更低于分化较高的胃癌患者；有数据显示，在被确诊的胃癌患者中，检测他们几年前的血样品可以发现，1/3的患者在当时还健康的情况下血清PG水平已经降低；PGⅠ与PGⅠ/PGⅡ比值并联使用灵敏度高，可有效应用于胃癌高发区人群的初步筛查。因此，PG检测被称为胃部的“血清学活检”，作为非侵入性方法，降低患者痛苦，简便、经济，具有普查价值。

在人群胃病筛查中，每个人做胃镜是不现实的，可通过非侵入性血清PG检测将浅表性胃炎、糜烂性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡、胃癌等高危人群筛查出来，再进行胃镜检查是一种切实可行的方案。

光激发化学发光免疫分析技术是以纳米级高分子微粒为基础的新一代化学发光免疫技术，该项技术前景广阔，将被广泛地应用于研究生物分子的相互作用。又称为AlphaLISA分析法，被誉为免洗的ELISA。其主要原理是由光激发产生的均相化学发光技术，它具有快速、均相（免洗）、高灵敏、量程宽和操作简便的特点。该试剂由含有感光化合物的感光微粒和含有发光化合物的发光微粒组成，微粒直径约188nm，表面覆盖多糖水凝胶。水凝胶能减少非特异性结合，同时，增加微粒的悬浮性。微粒通过水凝胶表面的功能团与生物分子共价连接。纳米级微粒大大增加了反应的表面积，每个微粒表面覆盖着成百上千个生物分子，可捕获目标分子。

该技术的核心原理是单线态氧的产生和传递。在受到红色激光（680nm）照射后，感光微粒能使周围环境中的氧转化为单线态氧，单线态氧的生存时间仅为4微秒。短暂的生存时间决定了单线态氧的传播直径很小（约为200nm）。如果发光微粒在200nm范围之内就能接受单线态氧，并发出高能级的光（520nm-620nm）。反之，单线态氧就会回落到基态氧而没有信号产生。这种依赖于两种微粒相互接近的化学能量传递是均相反应的基础。通常在该反应体系中，微粒的浓度是很低的。两种微粒相互随机碰撞的几率很低，因此，反应体系的本底非常微弱。如果包被在微粒表面的生物分子相互作用，拉近了两个微粒的距离，例如形成免疫夹心或受体-配体复合物，这样就能产生能量的有效传递并发出光信号。

生物素-链霉亲和素与免疫分析试剂偶联起来，可大大提高免疫分析的测定灵敏度：因为链霉亲和素与生物素之间极高的亲和力，使反应结合更牢固稳定，而且特异性高；每个链霉亲和素（亲和素）可结合4个生物素，可使反应明显放大、减少反应中的空间位阻。

实用新型内容

本实用新型目的是：提供一种新型的PGⅠ光激发化学发光检测试剂盒，运用生物素-链霉亲和素（包括亲和素）的放大效应和先进的光激发化学发光检测技术，将双抗夹心法的信号放大，达到高灵敏、特异性好、量程范围宽、反应时间短的目的。

本实用新型的技术方案：一种胃蛋白酶原Ⅰ的光激发化学发光检测试剂盒，由白色不透明微孔板（1），胃蛋白酶原Ⅰ标准品（2），连有抗胃蛋白酶原Ⅰ单克隆抗体的发光微粒（3），生物素化抗胃蛋白酶原Ⅰ单克隆抗体溶液（4）和包被有链霉亲和素的感光微粒（5）组成；胃蛋白酶原Ⅰ标准品浓度范围0-300ng/mL。

该血清（浆）PGⅠ光激发化学发光检测试剂盒，试剂盒内设有不透明反应板、抗原标准品、生物素标记抗体、连有PGⅠ抗体的发光微粒，以及，包被有链霉亲和素的感光微粒试剂，另附操作说明书。