[发明专利]臭茉莉HPLC标准指纹图谱及其建立方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，更为具体地，涉及臭茉莉HPLC指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱。

背景技术

臭茉莉（别名：臭矢茉莉，臭茉莉，大髻婆，单茉莉，过墙风）,为马鞭草科植物臭茉莉的干燥茎或根，为常用中草药，现收载于《广东省中药材标准》，具有祛风除湿，利水消肿的功效，常用于治疗风湿骨痛，脚气水肿，支气管炎、高血压症及湿疹疥疮，皮肤瘙痒等皮肤疾病。广东省各地有产，以阳山，宝安，三水等地产出较多。其根茎均可入药微苦，平。归肝、脾、肾经，有祛风除湿，利水消肿的功效。用于风湿骨痛，脚气水肿；可治疗支气管炎、高血压病。外用治湿疹疥疮，皮肤瘙痒。

臭茉莉原定名为Clerodendron fragrans auct．non．Vent．，Clerodendron philippinum Schauer var．simplex Moldenke，变种臭茉莉Clerodendron lindleyi Decne．ex Planch．和原变种重瓣臭茉莉C．philippinum Schauer Var．philippinum。

现有标准对臭茉莉质量控制只有性状鉴别及显微鉴别，国内外关于臭茉莉的研究报道极少见，尚没有对臭茉莉的指纹图谱的质量控制方法的相关报道。本发明是在对臭茉莉根和茎进行了系统的化学成分研究上，采用HPLC方法，建立能较全面反映臭茉莉药材质量的指纹图谱，对控制臭茉莉原料和产品的质量有重要意义。

发明内容

现有标准对臭茉莉质量控制只有性状鉴别及显微鉴别，质量控制方法水平不高，本发明所要解决的是对现有的臭茉莉的质量控制方法水平不高，提供了一种臭茉莉的标准指纹图谱，利用该标准图谱更好的控制臭茉莉的质量，保证药品使用的安全有效，同时本发明还提供了一种臭茉莉标准指纹图谱的建立方法和应用。

本发明通过以下技术方案予以实现上述目的：

一种臭茉莉HPLC标准指纹图谱，其特征在于，包括13个共有特征峰，保留时间分别为：0.183、0.204、0.243、0.493、0.514、0.669、0.718、0.892、1.151、1.179、1.245、1.482、18.541 min。

一种臭茉莉HPLC标准指纹图谱，其特征在于，包括21个共有特征峰：以9号峰为对照峰（9号峰为毛蕊花糖苷峰，保留时间为18.541min），其他的20个共有峰的相对保留时间为：0.183、0.204、0.243、0.493、0.514、0.669、0.718、0.892、1.151、1.179、1.245、1.482、1.493、1.517、1.605、1.635、1.743、1.795、2.044、2.203。

 一种臭茉莉HPLC标准指纹图谱的建立方法，包括如下步骤：

    S1.供试品溶液的制备：称取样品，加入提取溶剂，浸润10~60分钟，超声提取30~60分钟，过滤蒸干后溶解即得供试品溶液；

    S2.指纹图谱的制作：将S1所得溶液过色谱分离柱，加入乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱，流速0.8~1.2mL/min，乙腈在洗脱过程中体积分数变化规律：0~12min,14~17%;12~18min,17~20%18~20min,20~20%20~35min,20~40%;35~40min,40~78%;40~50min,78~88%；检测波长327nm，柱温25~35℃；在此条件下分析供试品溶液，得到臭茉莉的指纹图谱；

S3.标准指纹图谱的确定：对11批臭茉莉建立HPLC指纹图谱，通过分析比较，确定共有特征峰，这些共有特征峰作为臭茉莉的标准指纹图谱。

优选地，S1中所述提取溶剂为石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、50%甲醇、70%甲醇或70%乙醇；更为优选地，S1中所述提取溶剂为甲醇。

    优选地，S1中所述样品与提取溶剂的重量与体积比为1：25~50。

    优选地，S1中所述浸润的时间为30分钟，超声提取的时间为45分钟。

    优选地，S2中所述色谱分离柱为安捷伦  ZORBAX-C18 （250 mm×4.6 mm,5μm）、赛默飞 Hypersil ODS2 （4.6mm×250mm，5μm)或菲罗门Phenomenex Synergi 4u Fusion-RP 80A（250 mm×4.6 mm）。

优选地，S2中所述色谱分离柱为安捷伦ZORBAX-C18 （250 mm×4.6 mm,5μm）。

优选地，S2中所述流速为1.0mL/min。