[发明专利]一种硫酸新霉素的生产方法

说明书

技术领域

本发明属生物制药领域，涉及一种硫酸新霉素的生产方法。

背景技术

硫酸新霉素生产工艺中，发酵过程大量使用粮食加工类的原材料，其中，由碎米经粉碎、过筛所得的米粉，在发酵培养基中所占比例最大。由于碎米原料来源不稳定，加工工艺相比其他原材料较为简单，加工过程中操作人员劳动强度大，噪音大、粉尘多，工作环境恶劣。同时，碎米加工后的米粉颗粒度较粗，一方面降低了米粉被微生物吸收利用的程度；另一方面过多的剩余干物质给清洁生产带来了较大的难度，增加了企业的环保压力。

发明内容

本发明的目的是提供硫酸新霉素一种新的生产方法，用淀粉代替米粉，直接投料，减少加工环节，为提高和稳定发酵生产水平奠定基础。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案是：一种硫酸新霉素的生产方法，包括以下步骤：

1）从砂土管中取砂土放入无菌水中,充分摇均，制成孢子悬浮液；用吸管吸取孢子悬浮液，按0.05ml/支涂布于斜面培养基上，放入培养箱中培养4-12天，温度控制在28±2℃，斜面长好后放入2-8℃的冰箱内保存备用；

2）向步骤1）所得的斜面放入玻璃珠，进行振摇，将斜面上的孢子打下，后加入适量无菌水洗下孢子，倒入已灭好菌的玻璃瓶中，放入2-8℃的冰箱内保存备用；

3）将步骤2）所得的物料接入灭菌后的种子罐进行培养，温度控制在35±5℃，罐压为0.02~0.1Mpa，培养35-45小时，得到菌丝；

4）以重量计，称取淀粉4.5-5.5份、花生饼粉2.6-3.0份、黄豆饼粉0.4-0.6份、葡萄糖1.4份、酵母粉0.5份及无机盐1份，投入至发酵罐内配制发酵基础培养基，加水搅拌溶解均匀，过滤灭菌，然后将步骤3）长好的菌丝接入发酵罐内，进行发酵培养，发酵温度为35±5℃，罐压为0.02~0.1Mpa，发酵时间为130h以上；

5）发酵完成后将发酵液放入吸附罐内，加入732树脂进行吸附，然后进行解吸，收集解吸液进行浓缩和转盐精制得硫酸新霉素精制液，后喷粉制成成品。

步骤1）中所述的斜面培养基中含葡萄糖1.0wt％，牛肉膏0.2wt％，琼脂1.8~2.2wt％，磷酸氢二钾0.05wt％，D~L天冬素0.05wt％，pH为7.5~8.0；配制好后分装在容器中，于0.104Mpa，121℃湿热灭菌30分钟，稍冷后制成斜面，28±2℃培养箱空白培养6~7天，无菌备用。

优选的，步骤4）中淀粉为5份。

步骤5）中将发酵液放入吸附罐内，搅拌并调节pH为6.4~7.0，加水稀释发酵液生物效价至13000μ/ml以下，温度控制在40±3℃，再加入732树脂进行吸附。

步骤5）中按每毫升发酵液交换9～11万单位新霉素的量加入732树脂进行吸附。

步骤5）中具体解吸步骤为：

a、先用饮用水洗净树脂；

b、用0.12~0.15mol/L盐酸和0.4mol/L氯化铵配制的洗涤剂洗涤饱和树脂；

c、用饮用水洗涤至pH6.0-7.0

d、通入0.06~0.09mol/L氨水洗饱和树脂，出口效价控制在500-1500u/ml；

e、饮用水正向洗涤至pH为8.0-10.0，然后再用饮用水反洗30分钟以上；

f、通入2.5～3.0mol/L氨水进行解吸，串入700柱脱色，当脱色柱出口效价大于1000μ/ml时开始收集解吸液，待高单位过后，效价低于4000u/ml时结束收集。

步骤5）中解吸及液浓缩时工艺参数：真空度：≤-0.07Mpa；

浓缩温度：≤80℃；

解吸液流速：≤3000L/h。

步骤5）中转盐步骤具体为搅拌下缓慢加入冷却的5.5～6.5mol/L硫酸，控制温度低于60℃，不断监测转盐液的pH值，pH值在6.0—6.8时终止反应。

本发明提供的一种硫酸新霉素的生产方法，具有的有益效果为：

1、减少物料损耗

任何物料在经过加工后，都会存在物料的损耗，碎米本身是供应商在大米生产区的粮食加工厂收购而来，由于生产需求量大，供应商往往会在不同的粮食加工厂收购合并，然后运输至生产仓库，再转运至粉碎工序进行物料粉碎，制得米粉。根据近几年的碎米采购量与米粉使用量的数据分析，购进的碎米量仅有90%用于发酵基础培养基的配制，其余部分都在转运、粉碎、过筛、包装等过程中损耗了。