[发明专利]一种硫酸新霉素的生产方法有效
申请号: | 201210584060.3 | 申请日: | 2012-12-28 |
公开(公告)号: | CN103074401A | 公开(公告)日: | 2013-05-01 |
发明(设计)人: | 沈联兵;何连明;周云 | 申请(专利权)人: | 宜昌三峡制药有限公司 |
主分类号: | C12P19/52 | 分类号: | C12P19/52 |
代理公司: | 宜昌市三峡专利事务所 42103 | 代理人: | 成钢 |
地址: | 443002*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 硫酸 新霉素 生产 方法 | ||
1.一种硫酸新霉素的生产方法,其特征在于包括以下步骤:
1)从砂土管中取砂土放入无菌水中,充分摇均,制成孢子悬浮液;用吸管吸取孢子悬浮液,按0.05ml/支涂布于斜面培养基上,放入培养箱中培养4-12天,温度控制在28±2℃,斜面长好后放入2-8℃的冰箱内保存备用;
2)向步骤1)所得的斜面放入玻璃珠,进行振摇,将斜面上的孢子打下,后加入适量无菌水洗下孢子,倒入已灭好菌的玻璃瓶中,放入2-8℃的冰箱内保存备用;
3)将步骤2)所得的物料接入灭菌后的种子罐进行培养,温度控制在35±5℃,罐压为0.02~0.1Mpa,培养35-45小时,得到菌丝;
4)以重量计,称取淀粉4.5-5.5份、花生饼粉2.6-3.0份、黄豆饼粉0.4-0.6份、葡萄糖1.4份、酵母粉0.5份及无机盐1份,投入至发酵罐内配制发酵基础培养基,加水搅拌溶解均匀,过滤灭菌,然后将步骤3)长好的菌丝接入发酵罐内,进行发酵培养,发酵温度为35±5℃,罐压为0.02~0.1Mpa,发酵时间为130h以上;
5)发酵完成后将发酵液放入吸附罐内,加入732树脂进行吸附,然后进行解吸,收集解吸液进行浓缩和转盐精制得硫酸新霉素精制液,后喷粉制成成品。
2.根据权利要求1所述的硫酸新霉素的生产方法,其特征在于:步骤1)中所述的斜面培养基中含葡萄糖1.0wt%,牛肉膏0.2 wt%,琼脂1.8~2.2 wt%,磷酸氢二钾0.05 wt%,D~L天冬素0.05 wt%,pH 为7.5~8.0;配制好后分装在容器中,于0.104Mpa,121℃湿热灭菌30分钟,稍冷后制成斜面,28±2℃培养箱空白培养6~7天,无菌备用。
3.根据权利要求1所述的硫酸新霉素的生产方法,其特征在于:步骤4)中淀粉为5份。
4.根据权利要求1所述的硫酸新霉素的生产方法,其特征在于:步骤5)中将发酵液放入吸附罐内,搅拌并调节pH为6.4~7.0,加水稀释发酵液生物效价至13000μ/ml以下,温度控制在40±3℃,再加入732树脂进行吸附。
5.根据权利要求1所述的硫酸新霉素的生产方法,其特征在于:步骤5)中按每毫升发酵液交换9~11万单位新霉素的量加入732树脂进行吸附。
6.根据权利要求1所述的硫酸新霉素的生产方法,其特征在于:步骤5)中具体解吸步骤为:
a、先用饮用水洗净树脂;
b、用0.12~0.15 mol/L盐酸和0.4 mol/L氯化铵配制的洗涤剂洗涤饱和树脂;
c、用饮用水洗涤至pH6.0-7.0
d、通入0.06~0.09 mol/L氨水洗饱和树脂,出口效价控制在500-1500u/ml;
e、饮用水正向洗涤至pH为8.0-10.0,然后再用饮用水反洗30分钟以上;
f、通入2.5~3.0 mol/L氨水进行解吸,串入700柱脱色,当脱色柱出口效价大于1000μ/ml时开始收集解吸液,待高单位过后,效价低于4000u/ml时结束收集。
7.根据权利要求1所述的硫酸新霉素的生产方法,其特征在于:步骤5)中解吸及液浓缩时工艺参数: 真空度:≤— 0.07Mpa;
浓缩温度:≤80℃;
解吸液流速:≤3000 L/h。
8.根据权利要求1所述的硫酸新霉素的生产方法,其特征在于:步骤5)中转盐步骤具体为搅拌下缓慢加入冷却的5.5~6.5 mol/L硫酸,控制温度低于60℃,不断监测转盐液的pH值,pH值在6.0—6.8时终止反应。
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