[发明专利]一种制备酶与底物复合物晶体的方法无效
| 申请号： | 201210556687.8 | 申请日： | 2012-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN103063487A | 公开（公告）日： | 2013-04-24 |
| 发明（设计）人： | 李宏滨;刘一苇 | 申请（专利权）人： | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王朋飞;张庆敏 |
| 地址： | 100101 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 制备 复合物 晶体 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种制备酶与底物复合物晶体的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）将酶蛋白晶体放入防冻液中，置于-20℃中，5-10分钟；
2）迅速取出酶蛋白晶体，加入与防冻液等体积的底物；
3）将酶蛋白晶体与底物复合物再次置于-20℃中，5-10分钟；
4）取出后迅速放入液氮中固定。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酶蛋白晶体为6-磷酸-β-葡萄糖苷酶。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述底物为对硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷-6-磷酸。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述对硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷-6-磷酸的浓度为20mM。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述防冻液为50%甘油和池液，体积比为1:2。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述池液为0.1M4-羟乙基哌嗪乙磺酸钠pH 7.5、10%异丙醇和20%聚乙二醇4000。
7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，进一步通过X光衍射仪收集复合物晶体数据。
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