[发明专利]一种葡萄耐盐性的快速鉴定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种葡萄耐盐性的快速鉴定方法。该项内容可以适用于扦插类木本植物的耐盐种质资源的快速鉴定与筛选，属于农业生物技术领域。

背景技术

当前全球土地沙漠化、盐碱化逐步加重，全球盐碱地正以每年100～150万公顷的速度增长。我国盐碱地主要分布在17个省区，具有农业利用潜力的盐碱荒地、盐碱障碍耕地面积近2亿亩，由于我国目前环境、资源等压力不断增大，加之城镇占地、工业占地扩大，因此积极改良、开发利用盐碱地资源对缓解土地压力、增加后备耕地储备、保障农业生产安全具有重要意义。

葡萄是我国果树中的主栽品种之一，在农业经济中的具有重要地位，中国的葡萄栽培已有数千年历史。但葡萄属于对盐碱敏感的非盐生植物，过量的盐碱不仅影响葡萄的生长、产量和品质，还会引起叶斑、落叶、枯枝甚至死树，但因自身的遗传和栽培条件不同，不同品种间耐盐碱性存在明显的差异。

葡萄对土壤的适应性较强，除了沼泽地和重盐碱地不适宜生长外，其余各类型土壤都能栽培。盐害对葡萄的伤害主要表现在渗透胁迫、离子毒害与养分不均衡、膜伤害三个方面，在葡萄的耐盐性指标评价上多采用形态指标、生长量指标、土壤含盐量指标和生理生化指标等的综合。目前对葡萄耐盐性评价多以葡萄苗为试验材料，由于葡萄苗的育成常常要1-2年，而且需要一定空间和时间，从而导致葡萄耐盐性评价试验周期长，花费成本高，亦阻碍了葡萄耐盐种质资源的筛选与推广进程。

发明内容

为高效快速鉴定葡萄的耐盐性能，本发明提供了一种方法简单、成本低廉、评价直观、试验周期较短的葡萄耐盐性快速鉴定方法。

本发明通过以下技术方案实现：

一种葡萄耐盐性的快速鉴定方法，包括以下步骤：

(1)冬春季剪伐的带芽插条长度要求在15-20cm，茎径1cm左右，芽饱满，插条带芽数3-5个。

(2)插条在置入培养液之前将最低位芽下3cm左右位置剪成斜面，在插条顶端用保鲜膜包裹。

(3)营养液为含有细胞分裂素的Hoagland培养液，营养液中含1/10的Hoagland培养液，细胞分裂素选用下列之一，6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)0.1～1.0mg/L，或者萘乙酸(NAA)0.01～0.02mg/L，或者吲哚乙酸(IAA)0.2～0.5mg/L，营养液每5天更换一次。

(4)将插条预处理后按生长方向将下端置入有营养液的广口瓶中，在25℃，18R:6D的光照培养箱中促芽萌发、出叶。

(5)在葡萄芽出叶达到3～5个展平叶时，将带有叶片的插条分组，分别置于不同氯化钠浓度的溶液中继续培养，用于协迫生长的溶液中氯化钠浓度为0～0.6％，浓度梯度0.05％或者0.1％。

(6)逐日观测记载叶的变化，叶的生长速度，具体包括芽心叶叶片的颜色变化(黄化、失绿、枯黄)、已出叶片的颜色变化(黄化、失绿、枯黄)、出叶速度、以及落叶状况。

(7)以“盐害分级标准”考查方法为主要描述评价葡萄的耐盐性，评价葡萄能够适应在某个盐浓度生长的形态指标(以清水培养的葡萄性状指标为参照)：芽心出叶正常、出叶速度正常、展开正常、10％以下叶片有失绿斑、无盐害性枯落叶。

(8)盐害分级标准

0级：生长正常，无盐害症状；

1级：轻度盐害，有少部分叶尖、叶缘变黄枯干，盐害性枯落叶量小于总叶量的20％；

2级：中度盐害，有相当一部分叶尖、叶缘焦枯，盐害性枯落叶量约占总叶量的20％～50％；

3级：重度盐害，大部分叶尖、叶缘焦枯，半数以上的叶片枯死或脱落，盐害性枯落叶量约占总叶量的50％～80％；

4级：极重度盐害，超过80％的叶片枯死甚至脱落，仅有少量绿色，甚至全株死亡。

附图说明

图1.藤稔葡萄插条与盆栽苗脯氨酸含量变化

图2.不同品种葡萄插条SOD酶活性

图3.不同品种葡萄插条MDA含量变化

图4.不同品种葡萄插条脯氨酸含量

具体实施方式

本发明的实施例体现了本专利保护范围，但本专利保护范围不局限以下实施例。