[发明专利]一种人参须根中人参稀有皂苷组的分离方法

说明书

技术领域

本发明属于一种从人参须根中分离人参稀有皂苷组的方法

背景技术

人参（panax ginseng C. A. Meyer）是名贵中药，用药已有两千多年的历史。其主要有效成分为人参皂苷类化合物，具有抗疲劳、延缓衰老、调节中枢神经系统、提高机体免疫力、改善心脑血管供血不足、抑制肿瘤细胞生长等作用。（黎阳等，中草药：Vol. 40 (1)，2009，164-166）。研究表明，其中一些稀有人参皂苷具有很好的药理活性，越来越引起人们的重视。（赵立亚等，大连轻工业学院学报：Vol. 21(2)，2002，112-115；张春枝等，食品与发酵工业：Vol. 28 (4)，2002 , 70 - 74）其中稀有人参皂苷Rg3、Rh2具有较强的抗癌活性（Kimys, The International Journal of Biochemistry &Cell Biology, 30 (3): 340 – 341 (1998)）。但是人参稀有皂苷在人参中天然含量极低，含量仅占万分之一到万分之五，并且分离较难、产量低。有学者通过硅胶柱分离酶转化的人参皂苷获得人参稀有皂苷（童庆宣等，天然产物研究与开发：Vol. (6)，2009，1039-1044）。此方法只能获得单一稀有皂苷，且方法复杂、费时，分离需要用大量有机试剂。宋长春等在高温高压条件下将原人参二醇组皂苷的水溶液与碱金属低醇化物或金属氢氧化物的醇溶液混合进行反应后再用低级醇萃取。此方法条件比较复杂而且稀有皂苷种类较少（宋长春等，中国专利：98100297.8，2002-9-25）。韩国学者通过直接碱解人参叶，之后通过柱层析分离得到人参稀有皂苷（CHA BC，Yakhak Hoechi: Vol. 38(4)，1994，425-429．），此方法杂质非常多，且后期纯化过程复杂。因此，目前迫切需要对人参稀有皂苷的提取分离进行改进。由于人参价格昂贵, 从人参中提取皂苷成本较高, 有研究利用人参须根提取人参皂苷。人参须根是人参的细支根或须根，价格一般仅为人参的1/l0～1/2，而其总皂苷的含量一般高于人参主根中皂苷的含量，约为4%。（孙红祥,中兽医医药杂志：Vol. (2)，2001，6-8）。并且在利用人参生产红参等人参制品时，人参须根经常弃之不用。目前尚无从人参须根中分离人参稀有皂苷的报道。

发明内容

本发明目的是提供一种从人参须根中分离人参稀有皂苷组的方法。

将鲜人参须根，在温度为125℃的条件下，在蒸参箱中蒸制加工9.5小时，自然冷却至温度为70℃时，将人参须根取出粉碎备用。用10倍量（W/V）80%乙醇加热回流提取2次，每次1.5小时。回收乙醇至干后，冻干得到人参须根粗总皂苷。然后通过D101大孔树脂分离纯化，先用8倍柱体积的水洗脱，再分别用8倍柱体积的50%乙醇、80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱组分。之后利用稀有皂苷极性小，在不同溶剂中的溶解性差异，对所获得组分进一步纯化。将所收集80%乙醇洗脱组分溶剂蒸干后，用甲醇溶解样品，加入20倍量丙酮沉淀，静置沉淀2-4小时，过滤取上清液，蒸干溶剂，即得成分稳定的人参稀有皂苷组。经RRLC-Q-TOF-MS检测分析，人参稀有皂苷组包括20(S/R)-R_h1、R_g9、R_g8、F₂、R_g6、R_g4、R_k3、R_h4、20(S/R)-R_g3、20(S/R)-R_s3、R_k1、R_g5、20(S/R)-R_h2、R_s5、R_s4、R_k2、R_h3。

本方法充分利用人参须根，将其进行简单的蒸制后，通过80%乙醇提取、D101大孔树脂分离纯化、溶剂分离，分离纯化出了成分稳定的人参稀有皂苷组，产率在4.68%以上。该方法成本低、简便快捷、高效、易操作。

附图说明

    附图 1为人参须根粗总皂苷提取物的RRLC-Q-TOF-MS总离子流图。由图可以看出人参须根粗总皂苷成分较多，包含常见的人参皂苷和稀有人参皂苷。