[发明专利]一种富集和无分化扩增悬浮干细胞的方法无效
| 申请号： | 201210545385.0 | 申请日： | 2012-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN103045539A | 公开（公告）日： | 2013-04-17 |
| 发明（设计）人： | 殷勤伟;黄兵 | 申请（专利权）人： | 黄兵 |
| 主分类号： | C12N5/095 | 分类号： | C12N5/095 |
| 代理公司： | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 | 代理人： | 郑自群 |
| 地址： | 100101 北京市朝阳区安*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 富集 分化 扩增 悬浮 干细胞 方法 | ||
1.一种富集和无分化扩增悬浮干细胞的方法，其特征在于：在血液肿瘤细胞的集落培养中，向胚胎干细胞培养基中加入Delta-like 4，Jagged 1和FGF2成分因子为培养基主要组分，并向所述胚胎干细胞培养基中加入抑制GSK信号通路抑制剂和酪氨酸激酶抑制剂，进行半固体培养，血液肿瘤干细胞可以形成集落。
2.如权利要求1所述的一种富集和无分化扩增悬浮干细胞的方法，其特征在于：所述抑制GSK信号通路抑制剂和酪氨酸激酶抑制剂为CHIR99021、PD173074、PD184352或PD0325901。
3.如权利要求1所述的一种富集和无分化扩增悬浮干细胞的方法其特征在于：向所述胚胎干细胞培养基中添加占所述胚胎干细胞培养基体积30-100%的基础培养基。
4.如权利要求3所述的一种富集和无分化扩增悬浮干细胞的方法，其特征在于：所述基础培养基为DMEM或RPMI 1640。
5.如权利要求1至4任一权利要求所述的一种富集和无分化扩增悬浮干细胞的方法，其特征在于：所述扩增悬浮干细胞的培养基按体积比包括30-100%的DMEM基础培养基和0-70%的胚胎干细胞培养基HEScGRO。
6.如权利要求5所述的一种富集和无分化扩增悬浮干细胞的方法，其特征在于：所述扩增悬浮干细胞的培养基还含有0-2μg/ml的DII4、0-1μg/ml的FGF2、0-2μg/ml的Jag1、0-1μg/ml的SCF、0-1μg/ml的LIF、0-1μg/ml的TGF-β、0-1μg/ml的TPO、0-300nM的CHIR99021、0-1μM的PD173074、0-1μM的PD184352和0-1μM的PD0325901。
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