[发明专利]一种鸟粪石体外模型的构建方法

权利要求书

1.一种鸟粪石体外模型的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：

A、取100ml无菌玻璃试管，在超净工作台将人工尿液80ml转移至试管；

B、将0.5麦氏浊度菌液0.8ml加入人工尿液，38—42℃孵育；

C、于0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、24小时分别取5ml试管内液体，取其中100ul液体，点于96孔板内，并以显微镜观察摄片；

D、其余以紫外分光光度计检测OD600吸光度，记录读数；

E、检测完的人工尿液2000rpm 10min低速离心,取上清检测pH值，记录读数；

F、24小时后离心收集晶体，0.05M pH8.6 Tris-HCl洗3遍，干燥后以红外光谱及及偏振光显微镜分析。

2.根据权利要求1所述的一种鸟粪石体外模型的构建方法，其特征在于：所述人工尿液，以g/L计，各成分含量如下：CaCl2·2H2O，0.651； MgCl2·6H2O，0.651；NaCl，4.6；Na2SO4，2.3；KH2PO4，2.8；KCl，1.6；NH4Cl 1.0；Urea，25.0；Creatine，1.1；肉汤培养基，10.0。

3.根据权利要求2所述的一种鸟粪石体外模型的构建方法，其特征在于：所述0.5麦氏浊度菌液的制备方法，包括以下步骤：

A、从孵育了18-24小时的琼脂平板上挑出单个菌落，用盐水制成悬液；

B、在光线充足的地方，背对着有白色背景与黑色对比线条的卡片，将接种管与0.5号麦氏标准管进行目测比较，将菌悬液调至0.5麦氏浊度。

4.根据权利要求3所述的一种鸟粪石体外模型的构建方法，其特征在于：所述0.5号麦氏标准管的制备方法为：将0.117g氯化钡溶于10mlddH2O，浓度为0.048M，1ml浓硫酸加入99mlddH2O得0.18M硫酸；取0.5ml 0.048M氯化钡加99.5ml0.18M硫酸制得0.5麦氏比浊管。