[发明专利]龙芽草的组织培养与快速繁殖方法

权利要求书

1.龙芽草的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于该方法包括以下的步骤：

1）外植体的消毒：

取刚发育成熟的龙芽草羽状复叶中的较大小叶，加洗涤剂仔细刷洗，再用流水冲洗，在超净台里将叶片转入酒精溶液中浸泡，后转入消毒液中浸泡消毒，用无菌水冲洗，然后将叶片切成1~3 cm²的小块，以正面朝上的水平摆放方式接种到添加植物生长调节物质的MS培养基上；

2）不定芽诱导

外植体接入的MS培养基中添加的植物生长调节物质的组成包括：

6-BA  0.5~5.0 mg/L

TDZ   0.1~1.0 mg/L；

先进行暗培养，温度为25±1℃，培养条件为光/暗小时比为12~16:8~12，光照强度30~40 μmol/ｍ·s； 

3）切取叶片嫩绿、生长旺盛且2~3 cm高的不定芽，插入到生根培养基中，所述的生根培养基中包括：

基本培养基  （1/4~1）MS 

NAA          0.05~0.5 mg/L；

炼苗时微开培养瓶盖进行炼苗，20~30h后取出并洗净根部附着的培养基，移入土中，初期要做好保湿措施，并置于阴凉处，待新叶长出，即可除去烧杯。

2.根据权利要求1所述的龙芽草的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于步骤1）消毒液为滴加一滴1 mol/L NaOH的0.2%HgCl₂溶液。

3.根据权利要求2所述的龙芽草的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于步骤1）消毒时间为5~6 min。

4.根据权利要求1所述的龙芽草的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于步骤2）中添加的植物生长调节物质的组成包括：

6-BA  1.0~4.0 mg/L

TDZ   0.1~0.8mg/L。

5.根据权利要求1所述的龙芽草的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于步骤2）中添加的植物生长调节物质选用TDZ 0.3 mg/L +6-BA 2.0 mg/L。

6.根据权利要求1或3或4所述的龙芽草的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于步骤2）植物生长调节物质的组成还包括IAA、NAA或两者的组合，IAA的浓度为0~2.0 mg/L，NAA的浓度为0~0.5 mg/L。

7.根据权利要求5所述的龙芽草的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于步骤2）植物生长调节物质的组成还包括IAA，IAA的浓度为0.5~1.5 mg/L。

8.根据权利要求1所述的龙芽草的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于步骤3）生根培养基中NAA为 0.08~0.3mg/L。

9.根据权利要求7所述的龙芽草的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于步骤3）生根培养基为1/4MS+NAA 0.1 mg/L。