[发明专利]生物污泥中蛋白质提取方法无效
| 申请号: | 201210501795.5 | 申请日: | 2012-11-28 |
| 公开(公告)号: | CN102977181A | 公开(公告)日: | 2013-03-20 |
| 发明(设计)人: | 刘勇;郭祥 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
| 主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14;C02F11/00 |
| 代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 王丽 |
| 地址: | 300072 天*** | 国省代码: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 生物 污泥 蛋白质 提取 方法 | ||
1.一种生物污泥中蛋白质提取方法,其特征是步骤如下:
1)酸洗:脱水的生物污泥加水,然后加入浓盐酸,使含水率和浓盐酸含量分别为96%和10%,随后搅拌30min,再进行离心分离,使污泥含水率为92%;
2)高温酸溶胞:将第一步处理后的污泥放入容器中,然后放入高温消解装置中,加热至120℃后放置2h~8h,然后进行离心处理,得到离心溶液;
3)等电点的确定:取第二步得到的溶液至少6份,每份10ml,用氢氧化钠溶液调节一系列pH,室温下放置12h,随后进行高速离心分离,并测定的上清液的pH,然后采用菲琳-酚法测定上清液中蛋白质含量,以pH为横坐标、蛋白质浓度为纵坐标作图,以蛋白质浓度最低所对应的pH确定为其等电点pI;
4)等电点结晶:用氢氧化钠溶液对第二步得到的离心溶液剩余部分进行滴定至第三步确定的等电点pH,析出蛋白质固体,放置4h,然后采用离心分离分离蛋白质固体,再用95%乙醇对该固体进行搅拌洗涤,洗涤后再次进行离心分离得到蛋白质固体;
5)干燥:把得到的固体在烘箱中进行干燥,干燥温度为45℃。
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