[发明专利]一种模拟骨髓间充质干细胞移植体外模型的构建方法有效
| 申请号： | 201210492449.5 | 申请日： | 2012-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN102994450A | 公开（公告）日： | 2013-03-27 |
| 发明（设计）人： | 姜晓丹;李鹏;法志强;张润;孙海涛;刘翼 | 申请（专利权）人： | 姜晓丹;李鹏 |
| 主分类号： | C12N5/0793 | 分类号： | C12N5/0793;C12N5/0775 |
| 代理公司： | 广州知友专利商标代理有限公司 44104 | 代理人： | 宣国华 |
| 地址： | 510282 广东省广州市海珠区工业*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 模拟 骨髓 间充质 干细胞 移植 体外 模型 构建 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种模拟骨髓间充质干细胞移植体外模型的构建方法，其特征是含以下步骤：
(1)选取离体乳鼠皮层神经元，经培养鉴定后待用；
(2)选取离体大鼠骨髓间充质干细胞，经培养鉴定后待用；
(3)将大鼠骨髓间充质干细胞经预处理后，接种于步骤(1)的乳鼠皮层神经元中进行共培养，接种密度为1.0-5.0×104个/cm2，共培养时间为4~6天；
(4)将共培养后的大鼠骨髓间充质干细胞和乳鼠皮层神经元经光镜、荧光显微镜、原子力显微镜及扫描电镜检测，确立模拟骨髓间充质干细胞移植的体外模型建立，并在超微结构上鉴定确定皮层神经元与骨髓间充质干细胞之间突触样结构的形成。
2.根据权利要求1所述的模拟骨髓间充质干细胞移植体外模型的构建方法，其特征是：步骤(1)中离体乳鼠皮层神经元通过免疫荧光法鉴定。
3.根据权利要求1所述的模拟骨髓间充质干细胞移植体外模型的构建方法，其特征是：步骤(2)中大鼠骨髓间充质干细胞采用流式法鉴定。
4.根据权利要求1所述的模拟骨髓间充质干细胞移植体外模型的构建方法，其特征是：步骤(3)中大鼠骨髓间充质干细胞预处理为：取大鼠骨髓间充质干细胞，经胰酶消化，离心后，再经DMEM/F12培养基、2%B-27和2%胎牛血清重悬处理大鼠骨髓间充质干细胞即可。
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