[发明专利]一种奥沙利铂叶酸靶向脂质体及其应用

说明书

（一）技术领域

本发明涉及药物脂质体领域，尤其涉及一种奥沙利铂叶酸靶向脂质体及其应用。

（二）背景技术

奥沙利铂是第三代铂类抗癌药物。2004年FDA批准注射用奥沙利铂与5-氟脲嘧啶和亚叶酸联合用于进展期结肠直肠癌的一线治疗。现已上市的奥沙利铂制剂有水针剂和冻干粉针。奥沙利铂对中晚期结肠直肠癌疗效显著，也可治疗胃癌等其他消化道肿瘤。但随着奥沙利铂在临床上的大量应用，其不良反应也被不断发现和报告。神经毒性、胃肠道反应、骨髓抑制是其常见的不良反应。

脂质体是一种生物相容性好的给药系统，作为抗肿瘤药物的输送载体，可提高药物的肿瘤靶向性，降低药物毒性，因此受到人们的关注。将奥沙利铂制成脂质体输送至体内，可将药物更好的输送至肿瘤部位，提高药物的抗肿瘤作用，降低其毒性反应。奥沙利铂为水溶性药物，制备成脂质体之后，包封率不高且容易发生渗漏。既要保持脂质体较高的包封率，又不能因此降低脂质体中的药物浓度，这是制备奥沙利铂脂质体的一个难点。

普通脂质体进入体循环之后，会很快的被巨噬细胞识别并吞噬，以至于不能到达肿瘤组织。制备成长循环脂质体可使这种情况有所改善。

而配体靶向脂质体在脂质体表面链接有能主动靶向肿瘤的靶向配体，能增加药物的溶解性、延长药物的半衰期，提高药物的靶向性，降低毒副作用。叶酸是常用靶向配体，是一种人体必需的维生素没有毒性，对恶性肿瘤细胞表面过度表达的叶酸受体有高度亲合性，因此本发明选用叶酸作为靶向配体。中国专利200310124776.6、200710025130.0和WO/2007/099377中公开了奥沙利铂长循环脂质体，但它们要么采用的原料昂贵，要么工艺要求很高，要么包封率较低。

因此，本领域迫切需要提供一种价廉、工艺简单的制备奥沙利铂靶向脂质体的方法，并要求所获得的脂质体包封率高，靶向效果好。

（三）发明内容

本发明目的是提供一种包封率高、靶向效果好、毒副作用少、药动学行为明显改善的奥沙利铂叶酸靶向脂质体。

为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

一种奥沙利铂叶酸靶向脂质体，其制备原料包括奥沙利铂、磷脂、胆固酸、叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯和泊洛沙姆F68，所述叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯的结构如下所示：

其中，n=45～136。

本发明中，叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯作为靶向修饰物，所述的奥沙利铂叶酸靶向脂质体可以通过本领域的常规方法进行制备，本发明具体推荐通过反相蒸发-高压均质法进行制备。

本发明各原料组分中，磷脂与胆固醇的质量比为3～8：1，优选为5~7：1，最优选为6：1；奥沙利铂与磷脂的质量比为1：30～60，优选为1：45~55，最优选为1：50；泊洛沙姆F68与磷脂的质量比为1：5～15，优选为1：9 ~11，最优选为1：10；叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯与磷脂的摩尔比为1～10：100，优选为2~5：100，最优选为2.5：100。

具体的，所述奥沙利铂叶酸靶向脂质体的制备包括如下步骤：

取磷脂、胆固醇溶于二氯甲烷中，然后加入奥沙利铂的水溶液，搅拌，超声，旋转蒸发除去有机溶剂，待凝胶塌陷后，加入含叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯和泊洛沙姆F68的水溶液，继续蒸发，高压均质，用水定容，用切向流膜包进行超滤，用水作为置换液体，重复超滤，调整混悬液体积即得奥沙利铂叶酸靶向脂质体。

或者，所述奥沙利铂叶酸靶向脂质体的制备包括如下步骤：

取磷脂、胆固醇溶于二氯甲烷中，然后加入奥沙利铂的水溶液，搅拌，超声，旋转蒸发除去有机溶剂，待凝胶塌陷后，按组分加入泊洛沙姆F68的水溶液，继续蒸发，高压均质，加入叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯的水溶液混合，置于恒温振荡反应器，微振荡孵育，用水定容，用切向流膜包进行超滤，用水作为置换液体，重复超滤，调整混悬液体积即得奥沙利铂叶酸靶向脂质体。

作为优选，二氯甲烷与奥沙利铂的水溶液的体积比为2～4：1，最优选为3：1。

作为优选，所述的高压均质条件为：压力200～800 bar，时间2～8 min；更优选的高压均质条件为：压力300～500 bar，时间4～6 min；最优选的高压均质条件为：压力400 bar，时间5 min。

作为优选，切向流膜包的分子截留量为3K～50K，更优选为5~10K，最优选为10K。

作为优选，切向流膜包超滤次数为3~4次。