[发明专利]一种在线还原氨基酸二硫化物并测定氨基酸的装置及方法

权利要求书

1.一种在线还原氨基酸二硫化物并测定氨基酸的装置，主要由高压泵、高效液相色谱分离柱、在线还原柱、化学发光检测器组成；其中高压泵(1a)经过六通进样阀（2）依次与高效液相色谱分离柱（3）和在线还原柱（4）连接，再与化学发光检测器连接（5）；在线还原柱（4）与化学发光检测器（5）之间依次有高压泵(1b、1c、1d)通过T型连接管接入；

所述的在线还原柱（4）的结构是由树脂管（1）、玻璃纤维（2）、TCEP络合物晶体（3）和石英管（4）构成的，其中TCEP络合物晶体（3）填充在石英管（4）中，两端都填有玻璃纤维（2），石英管（4）的两端分别用树脂管（1）与其他仪器连接；

所述的石英管长度为4-12cm，内径为1-3mm；所述的TCEP络合物晶体是锌(II)的三(2-羧乙基)膦络合物晶体。

2.一种如权利要求1所述的在线还原氨基酸二硫化物并测定氨基酸的装置的测定方法，

同时启动4个高压泵（1a）、（1b）、（1c）、（1d）分别将三氟乙酸溶液、三角形金纳米溶液、鲁米诺溶液、过氧化氢溶液同时注入系统；其中三氟乙酸溶液流过六通进样阀（2）时，将通过注射器（6）注入到六通进样阀（2）中的待测样品载入高效液相色谱分离柱（3），样品中的各种氨基酸被分离后进入在线还原柱（4），溶液中的氨基酸二硫化物被TCEP络合物还原成相应的巯基氨基酸，再依次与三角形金纳米溶液、鲁米诺溶液、过氧化氢溶液在线混合，最后进入化学发光检测器（5）进行在线测定；

所述的待测样品是人体血浆或尿液，其中所含的氨基酸是巯基氨基酸和氨基酸二硫化物的混合物，其中巯基氨基酸是半胱氨酸、半胱氨酰甘氨酸、高半胱氨酸、谷胱甘肽和谷氨酰半胱氨酸的混合物；氨基酸二硫化物是胱氨酸和高胱氨酸的混合物；

所述的三角形金纳米溶液浓度为0.2-1.06nmol/L；

所述的三氟乙酸溶液中三氟乙酸体积百分数为0.05-0.25%、鲁米诺溶液摩尔浓度为0.002-0.02mmol/L、过氧化氢溶液摩尔浓度为0.2-10mmol/L；

所述的三氟乙酸溶液、三角形金纳米溶液、鲁米诺溶液、过氧化氢溶液在系统中的流速为0.2-2mL/min。