[发明专利]盐藻培养基、半连续培养方式及藻液中原生动物杀灭方法有效
申请号: | 201210479686.8 | 申请日: | 2012-11-23 |
公开(公告)号: | CN102936569A | 公开(公告)日: | 2013-02-20 |
发明(设计)人: | 王培磊;丰培金 | 申请(专利权)人: | 王培磊 |
主分类号: | C12N1/12 | 分类号: | C12N1/12;C12R1/89 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 276000 山东省临*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 培养基 连续培养 方式 藻液中 原生动物 杀灭 方法 | ||
1.一种盐藻培养基,其特征在于该盐藻培养基配方如下:
NH4NO3 40毫克,KH2PO4 1.2毫克,NaHCO3 450毫克,九二0植物生长刺激素(即赤霉素)6国际单位,f/2维生素溶液1毫升,f/2微量元素溶液1毫升,人尿2毫升,海泥抽取液5毫升,消毒海水1000毫升;其中f/2微量元素溶液配方:ZnSO4·4H2O 23毫克,MnCl2·4H2O 178毫克,CuSO4·5H2O 10毫克,FeC6H5O7·5H2O 3.9克,Na2MoO4·2H2O 7.3毫克,CoCl2·6H2O 12毫克,Na2EDTA4.35克,纯水1000毫升;f/2维生素溶液配方:维生素B12 0.5毫克,维生素B1 100毫克,维生素H0.5毫克,纯水1000毫升。
2.如权利要求1所述的盐藻培养基,其特征在于将人尿替换为腐化鱼汁2毫升。
3.如权利要求1所述的盐藻培养基的半连续培养方法,其特征在于包括如下步骤:
采用长度450厘米、周长200厘米的农用聚乙烯透明塑料薄膜袋培养,两头分别用纱布扎口;一端扎入1根充气管,末端连2个散气石,作散气用;塑料袋另一端扎入一根长约20厘米,直径6厘米的聚乙烯硬管,作出气管,此袋即为培养藻的容器;将此袋漂浮在盛有普通海水的水泥池中,水泥池长×宽×深=600厘米×400厘米×85厘米,塑料袋两端扎好后,用绳吊起,以防袋口沉入水中,向袋中加入0.8-1.4立方米的培养液并接入藻种,即可进行培养。每池吊袋6-8个;饱和卤水取自内陆盐湖,用蒸馏水稀释至盐度120‰,用次氯酸钠消毒法消毒,方法是1立方米海水中加入漂白液200-300mL,使海水中有效氯含量达到10-20mg/L,充气8-12小时后,用硫代硫酸钠中和余氯,硫代硫酸钠量由余氯的多少来确定,直到滴入淀粉碘化钾液不变色为止,按权利要求1所述的培养基配方加入营养盐,选纯种的对数生长期藻种接种,即生长良好、生活力旺盛、色泽鲜艳、无沉淀及无明显附壁现象的藻种,镜检无其它杂藻、原生动物等。接种密度3×104-4×104cell/mL,室外培养,自然光照射,温度28±3℃,光强5000-10000lx为最佳,气泵充入空气,充气量不宜太大,以藻细胞浮起不下沉即可,充气管末端连两个气石。夜间停止充气,白天行间隔充气,即充气1小时,停1小时,重复进行。培养4-6天,密度达60×104-120×104cell/mL,采收藻液的1/3,补加相同体积的新鲜培养基,继续培养,48小时后再采收藻液的1/3,补加相同体积的新鲜培养基,继续培养,如此循环进行,5-7个循环周期后即可全部采收。
4.使用如权利要求1所述盐藻培养基的藻液中原生动物杀灭方法,其特征在于:当培养基使用了10天以上时,藻液中会出现很多纤毛虫等原生动物,这时按每升藻液加入0.6克(NH4)2CO3的量加入(NH4)2CO3,连续充气4小时,使之充分溶解并混合均匀,这时藻液中会出现大量沉淀,停止充气,静置8小时,弃去沉淀物,将上清液移入到另一洁净的培养容器中,加入4-5倍体积的新鲜培养液继续培养。
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