[发明专利]Amycolatopsis sp.CGMCC1149新型羟基化酶(细胞色素P450)基因克隆及应用有效
申请号: | 201210479072.X | 申请日: | 2012-11-23 |
公开(公告)号: | CN103352043A | 公开(公告)日: | 2013-10-16 |
发明(设计)人: | 诸葛斌;方慧英;霍孝雨;诸葛健;宗红 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N9/02;C12N15/70;C12P17/06;C12R1/01 |
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地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | amycolatopsis sp cgmcc1149 新型 羟基 细胞 色素 p450 基因 克隆 | ||
1.一种Amycolatopsis sp.中分离的多核苷酸,其核苷酸序列为SEQ ID NO.1,并进行高效表达,同时建立洛伐他汀体外羟基化体系及一种利用生物转化合成无锡他汀新方法。
2.如权利要求1所述的多核苷酸序列,编码Amycolatopsis sp.羟基化酶(细胞色素P450),其氨基酸序列为SEQ ID NO.2。
3.如权利要求1所述的一种分离的多核苷酸SEQ ID NO.1,其特征是基因全长1212bp,编码403个氨基酸。
4.如权利1所述羟基化酶的高效表达,其特征为根据核苷酸序列SEQ ID NO.1设计一对引物,经PCR得到细胞色素P450的基因片段,构建表达质粒并实现在原核宿主中高效表达。
5.如权利1所述洛伐他汀体外羟基化体系及一种生物转化合成无锡他汀新方法,其特征为利用高效表达的羟基化酶建立洛伐他汀体外羟基化体系用于体外合成洛伐他汀羟基化产物I,产物I用于Amycolatopsis sp.转化合成无锡他汀。
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