[发明专利]三萜皂苷类化合物及其提取方法和在治疗心肌缺血/再灌注损伤中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种从铁线莲属植物中分离的新化合物，具体地说是从藏药甘青铁线莲中提取分离的一种三萜皂苷类化合物及其在治疗心肌缺血/再灌注损伤药物中的应用，属于医药技术领域。

背景技术

缺血性心脏病是人类最主要的致病死因，其高发病率和死亡率严重影响患者的生存质量，危及生命。目前临床治疗心血管疾病的药物主要有硝酸酯类，钙拮抗剂及β受体阻滞剂等。这些药物虽然具有一定的疗效，但频发的毒副作用限制了它们的应用。

毛茛科铁线莲属植物甘青铁线莲(Clematis tangutica)，别名唐古特铁线莲，藏药名又称叶芒那布、叶濛。主要分布于青藏高原地区，根据《晶珠本草》和《藏药志》等典籍记载，其性辛、甘、温，祛寒，增生胃火，活血通瘀，破痞瘤积聚。此外，甘青铁线莲作为复方制剂益心康泰胶囊的主药在治疗心脑血管疾病方面疗效显著。已有文献报道了甘青铁线莲中的三萜皂苷类成分（Zhong HM, Chen CX. et al, Triterpenoid Saponins from Clematis tangutica. Planta Med, 2001, 67 (5), 484；Du ZZ, Zhu N.et al, Two new antifungal saponins from the Tibetan herbal medicine Clematis tangutica. Planta Med.2003,69:547-551），但甘青铁线莲的有效成分仍不明确。

发明内容

本发明目的是提供一种对缺血/再灌注损伤心肌细胞有明显保护作用的三萜皂苷类化合物；

本发明另一目的是提供上述三萜皂苷类化合物的提取方法和应用。

本发明实现过程如下：

一种从甘青铁线莲中提取分离的新的三萜皂苷类化合物，采用高分辨质谱和二维核磁共振谱等光谱技术，以及化学方法，确定了该化合物的化学结构，结构式（I）表示的三萜皂苷类化合物， 

其化学名称为3β-O-[3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖]-23-羟基-齐墩果18烯-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖(3β-O-[3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranosyl]-23-hydroxyolean-18-en-28-oic acid-28-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside)，是从甘青铁线莲中分离的新的三萜皂苷类化合物，以下简称其为RAEG。

所述式（）化合物RAEG的制备方法，具体步骤如下：

（1）提取：甘青铁线莲为原料，原料经粉碎后，按重量体积比加入3~5倍原料重的甲醇或乙醇回流提取，共提取3次，每次1~3小时。合并提取液，回收溶剂，得甲醇或乙醇提取物，提取物分散于按重量体积比4~8倍的水中，再依次用石油醚、水饱和正丁醇萃取3次，回收溶剂，分别得到石油醚和正丁醇的两个萃取部位。

（2）分离：上述正丁醇层采用硅胶柱层析，以体积比为8:2:1～6.5:3.5:1的氯仿-甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，薄层层析检测，收集含式化合物RAEG的流份，再用Sephadex LH-20凝胶柱层析，以甲醇为流动相洗脱除去多糖和其他杂质，合并含RAEG的流份。最后再经高效液相色谱仪分离纯化，体积比为72:28的甲醇-水混合溶剂为流动相洗脱，得到RAEG的纯品。