[发明专利]具有抗氧化活性的车前草多酚的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于中药、食品技术领域。

背景技术

植物多酚是广泛分布于植物之中的一类复杂化合物，现代研究表明，很多疾病如组织器官老化等都与体内过剩的自由基有关，多酚通过清除自由基能对自由基诱发的生物大分子损伤起保护作用，因此，多酚类化合物在抗衰老、抗肿瘤、抗辐射、抑制高血压、降血脂等很多方面具有良好的生理活性。

车前草是车前科植物车前（Plantago asiatica L.）的干燥全草，是一味传统中药，也是卫生部规定可以用于保健食品的植物之一，具有清热利尿、渗湿通淋、明目、祛痰之功效，还具有保肝、降压、抑菌、降低血清胆固醇等多种药理作用。具有很好的医疗保健价值。

近年来，国内外对多酚的应用研究在逐渐增多，枇杷多酚（申请号/专利号：201010538005）、苹果多酚（申请号/专利号： 201010171146）、茶多酚（申请号/专利号： 200810181108）等已申请专利。而对车前草多酚的研究较少。

发明内容

本发明的目的是：提供一种具有抗氧化活性的车前草多酚的制备方法，它是从车前草植物中提取、纯化车前草多酚的方法。

本发明的制备方法是：

1、车前草多酚的提取，将车前草粉碎成20目-40目的粗粉，用乙醇溶液回流提取，车前草回流提取所用的乙醇溶液量按重量比为6-10倍，乙醇溶液浓度60-80%，回流提取时间为0.5-2h，提取后回收乙醇，加水制成0.5g车前草/mL的提取溶液， 5000rpm/min离心30min，弃去沉淀，得到车前草多酚提取溶液。

2、车前草多酚的纯化，车前草多酚提取溶液上到D101大孔树脂柱（上样量20-30mL/g树脂）上，上样速度2-4BV/h，吸附时间1-3h，洗脱溶剂10-90%乙醇溶液，洗脱速度2-6BV/h。经吸附，乙醇洗脱得到车前草多酚洗脱液，回收乙醇，冻干，得到车前草多酚。

车前草多酚的提取过程中，车前草回流提取所用的乙醇溶液量按重量比优选为8倍；乙醇溶液浓度优选为70%；回流提取时间为1h。

车前草多酚的纯化过程中，车前草多酚提取液上样速度优选为3BV/h；吸附时间优选为2 h；洗脱溶剂乙醇溶液，优选为30%；洗脱速度优选为4BV/h。

本发明的有益效果是：利用车前草为原料经乙醇溶液提取，采用大孔吸附树脂进行富集纯化，制备得到车前草多酚。大孔吸附树脂具有物理化学稳定性高、吸附容量大、选择性好、吸附速度快、再生处理方便、使用期长、节省费用等诸多优点。适合于工业生产。制备得到车前草多酚具有清除自由基、抗氧化的功能。在食品、医药、化妆品及功能食品方面具有很大开发潜力。

附图说明

图1是本发明车前草多酚对D-半乳糖诱导氧化损伤小鼠肝组织MDA水平的影响；

图2是本发明车前草多酚对D-半乳糖诱导氧化损伤小鼠肝组织GSH-Px活力的影响；

图3是本发明车前草多酚对D-半乳糖诱导氧化损伤小鼠肝组织T-AOC活性的影响；

图4是本发明车前草多酚对D-半乳糖诱导氧化损伤小鼠肝组织SOD活性的影响；

图5是本发明车前草多酚对D-半乳糖诱导氧化损伤小鼠脑组织MAO活力的影响。

具体实施方式

实施例1

（1）车前草多酚的提取

车前草粗粉100g，加入800mL的70%乙醇溶液回流提取3次，每次1小时，过滤，合并滤液，回收乙醇，加水制成200mL的提取液， 5000rpm/min离心30min，弃去沉淀，得到车前草多酚提取溶液。

（2）车前草多酚的纯化

车前草多酚提取液以3BV/h的速度上到D101大孔树脂柱上（上样量20-30mL/g树脂），吸附2小时后，先用蒸馏水洗脱至流出液无色，再用30%乙醇作为洗脱溶剂，以4BV/h速度洗脱至无色，收集洗脱液，回收乙醇、冻干，即得到车前草多酚3.8g。

实施例2

（1）车前草多酚提取

车前草粗粉200g，加入1600 mL的70%乙醇溶液回流提取3次，每次1小时，过滤，合并滤液，回收乙醇，加水制成400mL的提取液， 5000rpm/min离心30min，弃去沉淀，得到车前草多酚提取溶液。

（2）车前草多酚的纯化