[发明专利]一种增强间充质干细胞免疫抑制功能的方法有效
申请号: | 201210449608.3 | 申请日: | 2012-11-12 |
公开(公告)号: | CN102936578A | 公开(公告)日: | 2013-02-20 |
发明(设计)人: | 刘小盾;李栋 | 申请(专利权)人: | 山东省齐鲁干细胞工程有限公司 |
主分类号: | C12N1/38 | 分类号: | C12N1/38 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人: | 李桂存 |
地址: | 250000 山东省济南市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 增强 间充质 干细胞 免疫抑制 功能 方法 | ||
1.一种增强间充质干细胞免疫抑制功能的方法,其特征是将分离的间充质干细胞传代培养,用含有培养因子的培养基培养至细胞70%汇合,再更换溶有IFN-γ、IL-1β和黄体酮的培养基培养。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于溶有IFN-γ、IL-1β和黄体酮的培养基中含有1-600ng/mL的IFN-γ、1-200ng/mL的IL-1β和1-100μg/mL的黄体酮。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于溶有IFN-γ、IL-1β和黄体酮的培养基中含有50ng/mL的IFN-γ、20ng/mL的IL-1β和10μg/mL的黄体酮。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于含有培养因子的培养基中含有EGF 1-50ng/mL、FGF 1-50ng/mL、VEGF 1-50ng/mL和PDGF 1-50ng/mL。
5.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于含有培养因子的培养基中含有EGF 2ng/mL、FGF 2ng/mL、VEGF 2ng/mL和PDGF 2ng/mL。
6.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于含有培养因子的培养基和溶有IFN-γ、IL-1β和黄体酮的培养基中均含10%(体积比)的胎牛血清和2mM/mL的谷氨酰胺。
7.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于含有培养因子的培养基和溶有IFN-γ、IL-1β和黄体酮的培养基的基础培养基均为DMEM/F12。
8.根据权利要求1、2、4、6、7中任一项所述的方法,其特征在于取传代2-5代的间充质干细胞,培养24-48小时,使其达到70%汇合。
9.根据权利要求1、2、4、6、7中任一项所述的方法,其特征在于间充质干细胞在溶有IFN-γ、IL-1β和黄体酮的培养基中培养2-5天后,弃培养基,收获免疫抑制功能增强的间充质干细胞。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法,其特征在于所述间充质干细胞为人类新生儿脐带间充质干细胞。
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