[发明专利]一种从银杏叶中提取分离银杏内酯B的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种提取银杏内酯B的方法。

背景技术

银杏内酯是目前强有力的特异性血小板活化因子（PAF）受体阻断剂之一，银杏内酯B是银杏内酯中对PAF受体阻断作用最强的，可剂量依赖性的消除PAF所引起的血小板聚集作用，从而防止血栓的形成。药理研究表明银杏内酯B具有抗过敏、抗炎症、抗休克作用，对缺血性损伤及器官移植排斥反应也有保护作用。银杏内酯B在目前市售的银杏叶提取物中含量较低且具有特定结构，其提取分离得到高纯度、高收率的银杏内酯B难度较大。

本发明者们查阅国内外文献，目前与银杏内酯B单体分离/制备方法直接相关的授权发明或者专利主要有：

①ZL200310104958（《模拟移动床色谱分离提纯银杏内酯B的方法》）：该方法以银杏叶为原料，经过水煮得到银杏浸膏，每克银杏浸膏加入0.8~1.2L乙酸乙酯萃取，模拟移动床纯化、乙醇重结晶、甲醇重结晶得到纯度大于90%的银杏内酯B单体。该发明乙酸乙酯用量很大，基于移动床色谱分离银杏内酯B，成本较高。

②ZL00117758.3（《由银杏叶或银杏叶浸膏制备药物银杏内酯A、B的方法》）：该发明是向银杏叶或其浸膏加入乙醇等浸取剂，得到的浸取液经过滤、分层，取出有机相去杂，然后经浓缩、干燥得富集GA、GB，采用制备型高效液相色谱再分离A与B。该发明的特征在于加入浸取液的同时加入氯化物盐析剂及去杂过程加入加盐或钠盐，液相色谱的分离柱流动相为乙酸乙酯和石油醚混合液，固定相为硅胶。该发明的单体纯化依赖于制备色谱，不能工业化大量生产。

③ZL200410061284（《银杏叶中银杏内酯B和白果内酯的提取方法》）：该发明将银杏叶用乙醇水溶液提取，上吸附柱去杂质，然后用乙酸乙酯萃取出银杏内酯，浓缩干燥后用乙醇溶解上酸性氧化铝柱，用乙醇洗脱，洗脱液分步结晶和重结晶，获得较纯的银杏内酯B和白果内酯。该发明银杏叶醇提取液采用液液萃取，用乙醇上柱，洗脱，洗脱液中杂质较多，导致最终银杏内酯B和白果内酯的纯度不是很高，收率低，时间长。

④CN101701019A（申请号200910184916.6，《一种银杏内酯A、B的分离纯化方法》）：该发明以纯度≥95%的银杏总内酯为起始原料，采用重结晶-超临界CO₂萃取组合工艺进行纯化，得到纯度≥99.5%的单体GA和GB。该发明对起始原料要求较高，采用超临界CO₂萃取对设备要求较高。

⑤CN101412725A（申请号200710050245.5，《从银杏叶中提取分离银杏内酯B的方法》）：该发明以银杏叶为原料，乙醇提取，提取液减压浓缩，浓缩液中加入乙酸乙酯萃取，有机相减压浓缩至浸膏；浸膏稀释后上选择性极性无孔吸附树脂柱，用乙醇洗脱，，洗脱液浓缩后用乙醇结晶得到银杏内酯类化合物，将银杏内酯类化合物结晶上硅胶柱，用正己烷和乙酸乙酯混合液洗脱，洗脱液浓缩结晶得到银杏内酯B单体。该发明的正相柱的洗脱为混合溶剂，不容易回收。

⑥CN101041661A（申请号200710051805.9《一种用免疫亲和层析色谱柱提取银杏内酯B的方法》）：该发明以银杏叶为原料，乙醇提取，提取液减压浓缩至粘稠物，将粘稠物上免疫亲和层析色谱柱，用磷酸缓冲液冲洗三次，然后用甲醇冲洗，即得银杏内酯B。但该方法适用于实验室少量样品制备，不能进行工业化生产。

⑦CN101392000A（申请号200810046162.3《银杏内酯A、B、C、J和白果内酯单体的高效分离纯化方法》）：该发明以银杏叶为原料，乙醇提取，提取液用石油醚萃取，水相加入乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯相减压浓缩后用甲醇溶解上制备高效液相，甲醇洗脱，分段收集洗脱液。减压浓缩至干得到单体。该发明依赖制备高效液相，适用于实验室少量样品制备，不能进行工业化生产。

⑧CN101054384（申请号200710106040.4《一种从银杏叶或银杏叶提取物中提取银杏内酯B的制备方法》）：该发明采用高速逆流萃取、聚酰胺和大孔树脂两次柱层析分离、重结晶相结合的方法，得到纯度>95%的银杏内酯B。该发明涉及两次不同的层析分离、会增加脱除产品中树脂残留物的难度。

⑨CN101302222（申请号200810024206.2《一种银杏内酯B原料及其制备方法》）：该发明取银杏叶或银杏叶提取物，在盐酸溶液中浸煮，浸煮液过滤后采用有机溶剂萃取，得到的萃取液浓缩后添加100~200目硅胶混合干燥，采用硅胶柱层析法收集富含银杏内酯B的洗脱液，经结晶得到银杏内酯B原料。其中，银杏内酯B原料纯度≥90%。

发明内容