[发明专利]一株对茶叶病源真菌具有抗性的深海沉积物来源枯草芽孢杆菌B5

说明书

技术领域

本发明涉及一株具有抗茶叶多种病原真菌致病性的深海沉积物来源枯草芽孢杆菌B5，该菌对常见茶叶病原真菌致病性具有很强的拮抗效果。

背景技术

中国是茶叶的故乡，福建是主要茶区，茶树病虫种类繁多、发生危害重，茶树害虫达390多种、茶树病害100余种。病虫为害不仅造成茶叶减产、品质下降，如茶园不合理用药，农药残留超标突出，会污染环境，影响消费者健康，也严重阻碍茶叶出口，实施病虫综合治理是发展无公害茶叶生产，确保茶叶优质、高产和可持续发展的重要环节。目前，中国茶叶在世界上是产茶大国，但还不是产茶强国，有很大一部分原因就是因为化学农药残留问题影响了茶叶的出口。为避免茶农盲目用药，生产中应采取预防为主、综合防治的策略，在了解病虫害规律的基础上，采取多种措施进行防治，从而达到经济、无公害的防治效果。微生物农药具有高效率、低残留对人畜无害等特点，是一种非常合适的选择。

深海占地球表面积的49%，是地球表面最大的生物栖息场所，深海环境中微生物基因资源的开发具有现实、重要的资源及科学价值。典型深海特征为低温(<5℃)和高压(最高达110MPa)，据估计在此极端条件下，深海环境中可培养微生物还不到0.01%。深海微生物由于其处于高压、低温（部分区域如热液口为高温）、厌氧、极端pH梯度、高盐浓度、高金属浓度、无光照、寡营养、高卤素等到特殊极端环境中，可产生许多结构新颖、功能独特及毒副作用低的次生代谢产物，各种代谢产物常常导致深海微生物尤其是深海细菌具有独特的对陆生菌抗性。这类具有真菌抗性深海细菌如今也成为了研究开发的热点。

菌对植物病原真菌的拮抗作用包含多种机制，一般认为有竞争作用、重寄生作用、抗生作用、诱导抗性以及协同拮抗作用。

竞争作用，主要为对生存空间和营养的竞争。枯草芽孢杆菌对环境的适应能力强、生长速度远快于病原菌，能与病原菌产生空间和营养的竞争，从而抑制其的生长，降低其种群数量，在抑制病原真菌过程中起着重要作用。酶的溶菌作用，枯草芽孢杆菌可以产生一系列挥发性和非挥发性的次生代谢物，抑制病原菌的生长，主要与β-1，3葡聚糖酶、几丁质酶、木聚糖酶、蛋白酶和纤维素酶等有关，通过酶的作用使真菌细胞壁遭到破坏，继而引起原生质解体。抗生作用，许多芽孢杆菌产生挥发性或非挥发性的抗菌素类物质，这些抗生物质的化学性质各不相同，包括了枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质等几大类。

1985年，北京农业大学陈延熙等研制的以枯草芽孢杆菌为主要成分的“增产菌”已在全国50多种农作物上推广施用，主要用于防治小麦纹枯病、水稻稻瘟病和油菜菌核病等，作物增产率达10%-50%。1992年，王雅平等利用枯草芽孢杆菌A0l4菌株对小麦赤霉病进行了防效研究，试验表明该菌株对小麦赤霉病防效达50.6%。1993年，王雅平等从丝瓜根际土壤中分离到枯草芽孢杆菌TG26菌株田间试验表明该菌株对西瓜枯萎病和小麦赤霉病防效分别为79.6%和73.1%，并具有显著的增产效果。1994年，张学君等用分离到的枯草芽孢杆菌B3菌株对小麦纹枯病进行防治试验，田间防效达50%-80%。1997年，陈志谊等用枯草芽孢杆菌B-916防治水稻纹枯病，防效达50%-81%。2002年，顾真荣等用枯草芽孢杆菌G3防治菜豆和茄子苗期的菌核病和炭疽病，防效分别为64.1%和35.4%，对番茄叶霉病防效为78.8%。

可湿性粉剂是农药中技术比较成熟的剂型，是农药的四大剂型之一，广泛应用于农药病害防治。可湿性粉剂一直处于稳步发展的状态，目前已形成了较大的生产能力。近年来不断有新的助剂、新的载体应用到可湿性粉剂的创制上，质量不断得到提高，在农业生产中发挥了重要作用。可湿性粉剂由原药、填料、表面活性剂、辅助剂等混合后粉碎到一定的细度而制成的制剂。表面活性剂包括分散剂、润湿剂等，辅助剂包括热稳定剂、光稳定剂、警戒剂等。可湿性粉剂使用时加水稀释，能够形成稳定的悬浮液，喷雾施用，与水具有高度亲和性，故称为“可湿性”，也有称为水和性，称为“水和剂”或“可分散性粉剂”。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一株具有抗茶叶致病真菌致病性的深海沉积物来源枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）B5。其由中国典型培养物保藏中心保藏（编号：CCTCC M2012384，保藏日期2012年9月27日，地点：中国武汉，武汉大学）。

本发明的菌株为深海来源，生长快速，芽孢率高，对茶叶生长中常见的致病真菌具有较强的抑制作用，能对茶园病害防治产生积极预防效果。