[发明专利]从海藻提取物中纯化岩藻依聚糖的工艺方法

权利要求书

1.从非均相混合物中纯化岩藻依聚糖的方法，所述方法包括：

(a)提供岩藻依聚糖源；

(b)通过用螯合剂处理除去上述源中的重金属离子，产生第一岩藻依聚糖混合物；

(c)选择性沉淀所述第一岩藻依聚糖混合物中的岩藻依聚糖，除去污染物；

(d)在水溶液中重悬含有岩藻依聚糖的沉淀物，获得第二岩藻依聚糖混合物；

(e)重复步骤(c)和(d)一次或多次；和

(f)过滤含有岩藻依聚糖的水溶液，除去细菌和内毒素污染物，产生纯化的岩藻依聚糖。

2.权利要求1所述的方法，其中所述纯化的岩藻依聚糖含有5到25百分重量的硫。

3.权利要求1或2所述的方法，其中岩藻依聚糖来源于藻类。

4.权利要求3所述的方法，其中岩藻依聚糖来源于墨角藻属或昆布属。

5.权利要求4所述的方法，其中岩藻依聚糖来源于墨角藻或海带。

6.权利要求1所述的方法，其中螯合剂选自下组：乙二胺四乙酸、乙二醇-双-(β-氨乙醚)N，N，N′，N′-四乙酸、2，3-二巯基丙醇-l-磺酸和2，3-二巯基琥珀酸。

7.权利要求6所述的方法，其中螯合剂是乙二胺四乙酸。

8.权利要求1所述的方法，其中螯合剂固定在固体载体上。

9.权利要求8所述的方法，其中螯合剂是亚氨基二乙酸螯合树脂。

10.权利要求1所述的方法，其中在所述第一岩藻依聚糖混合物中的岩藻依聚糖用乙醇选择性地沉淀。

11.权利要求10所述的方法，其中乙醇的浓度为40％到50％(v/v)。

12.权利要求10所述的方法，其中pH保持在5.7到6.0之间。

13.权利要求12所述的方法，其中pH调节到5.95。

14.权利要求10所述的方法，其中向所述第一岩藻依聚糖混合物或所述第一岩藻依聚糖混合物和第二岩藻依聚糖混合物中加入NaCl，浓度为20-24g/升。

15.权利要求1所述的方法，其包括重复步骤(c)和(d)三次。

16.权利要求1所述的方法，进一步包括冻干纯化的岩藻依聚糖。

17.一种组合物，其包括权利要求1-16任一项所述的方法产生的纯化的岩藻依聚糖，其中所述纯化的岩藻依聚糖具有通过电感耦合等离子体质谱检测的检测不到水平的砷、溴、铈、钴、铅、锂、钼、锡、钨和钒。

18.权利要求17所述的组合物，其中所述岩藻依聚糖有生物学活性。

19.权利要求18所述的组合物，其中所述岩藻依聚糖有促凝血活性。

20.权利要求17-19任一项所述的组合物，还包括药学上可接受的赋形剂。

21.权利要求17-20任一项的组合物在制造用于治疗需要增强凝血的受治疗者的药物中的用途。

22.权利要求21所述的用途，其中岩藻依聚糖以0.01mg/kg到100mg/kg的剂量给药。

23.权利要求21或22所述的用途，其中受治疗者患有选自下组的出血疾病：慢性或急性出血疾病、血液因子缺乏导致的先天性凝血疾病和获得性凝血疾病。

24.权利要求21或22所述的用途，其中受治疗者在急性受伤或受伤情况下需要增强止血。

25.权利要求21或22所述的用途，其中需要增强凝血的原因是先前使用了抗凝血剂、手术或其他侵入性的操作。

26.权利要求21或22所述的用途，其中需要增强凝血的原因是用作抗炎剂、抗癌剂、抗病毒剂或用于造血祖细胞动员。

27.权利要求1-16任一项的方法产生的岩藻依聚糖在制造用于治疗需要增强凝血的受治疗者的药物中的用途。