[发明专利]一种利用高速逆流色谱法制备西瑞香素的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，特别涉及一种利用高速逆流色谱法制备西瑞香素的方法。

背景技术

西瑞香素为香豆素类化合物，微黄色绵毛状细针晶(乙醇)，熔点250～252℃，CAS号2034-69-7，分子式C₁₉H₁₂O₇，分子量352.3，分子结构：

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了哥王为瑞香科植物，常以根部入药，味苦、微辛，寒，清热解毒，化痰散结，通经利水的功效。现代研究发现了哥王的根皮中具抗癌活性的物质，其中之一为西瑞香素就是主要成分。

现有从了哥王中分离西瑞香素的方法常采用硅胶柱层析方法。如邵曼丽发表的论文“了哥王化学成分的提取与分离”公开的方法为乙醇提取物经过硅胶柱层析用乙酸乙酯和正丁醇萃取部分洗脱，经反复硅胶柱色谱分离得到西瑞香素。再如专利（申请号：200710071851.5 ）“西瑞香素的提取方法及含西瑞香素的药物”和专利（申请号：201110292410.4）“一种从了哥王中提取西瑞香素的方法”，这两种专利公开的方法也都是采用硅胶柱分离。这些传统方法，一般操作比较复杂，分离周期长，而且收率低，污染严重。

高速逆流色谱是一种连续高效的液—液分配色谱分离技术， 它不用任何固态的支撑物或载体。它利用两相溶剂体系在高速旋转的螺旋管内建立起一种特殊的单向性流体动力学平衡，当其中一相作为固定相，另一相作为流动相，在连续洗脱的过程中能保留大量固定相。由于不需要固体支撑体，物质的分离依据其在两相中分配系数的不同而实现，因而避免了因不可逆吸附而引起的样品损失、失活、变性等，不仅使样品能够全部回收，回收的样品更能反映其本来的特性，特别适合于天然生物活性成分的分离。而且由于被分离物质与液态固定相之间能够充分接触，使得样品的制备量大大提高，是一种理想的制备分离手段。它相对于传统的固—液柱色谱技术，具有适用范围广、操作灵活、高效、快速、制备量大、费用低等优点。目前已经广泛应用于生物医药、天然产物、食品和化妆品等领域，特别在天然产物行业中已被认为是一种有效的新型分离技术；适合于中小分子类物质的分离纯化。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术的不足和缺陷，提供一种利用高速逆流色谱法制备西瑞香素的方法。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种利用高速逆流色谱法制备西瑞香素的方法，其特征在于：取了哥王药材粉碎，加入加入50-90%甲醇溶液超声提取2-3次，提取液浓缩后用乙酸乙酯萃取，收集萃取液回收试剂，再用高速逆流色谱仪分离，紫外检测器在线监测，收集流分减压干燥即得。

上述方法所述的超声提取为：用5-8倍量60-90%的甲醇溶液超声提取20-50分钟，提取2-3次。

上述方法所述的高速逆流色谱仪分离条件为：取氯仿、甲醇、水，按5:3~10:1~5混合，取上相做固定相、下相为流动相，主机转速700~1000rpm，流速调节为1~4ml/min。

本发明的积极效果是：采用高速逆流色谱法分离，制备周期短，操作简单，制备量大，而且样品不损失，对环境友好，适合工业化生产。

具体实施方式：

实施例1：

取了哥王药材，干燥后粉碎，称3kg，每次用18L80%甲醇溶液超声提取30分钟，提取2次，提取液减压浓缩至无醇，加乙酸乙酯溶液萃取3次，合并萃取液回收乙酸乙酯得萃取物。取氯仿、甲醇、水，按3:2:3混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速800rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，用流动相溶解萃取物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得淡黄色粉末，经高效液相检测，含量98.8%，收率75%。

实施例2：

取了哥王药材，干燥后粉碎，称3kg，每次用15L700%甲醇溶液超声提取30分钟，提3次，提取液减压浓缩至无醇，加乙酸乙酯溶液萃取3次，合并萃取液回收乙酸乙酯得萃取物。取氯仿、甲醇、水，按5:2:7混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速900rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为3ml/min，用流动相溶解萃取物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得淡黄色粉末，经高效液相检测，含量99.1%，收率64%。

实施例3：

取了哥王药材，干燥后粉碎，称3kg，每次用24L90%甲醇溶液超声提取30分钟，提取2次，提取液减压浓缩至无醇，加乙酸乙酯溶液萃取3次，合并萃取液回收乙酸乙酯得萃取物。取氯仿、甲醇、水，按5:2:4混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速1000rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，用流动相溶解萃取物，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得淡黄色粉末，经高效液相检测，含97.2%，收率71%。