[发明专利]一种麦冬多糖的制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种麦冬多糖及其制备方法，属于中药制剂领域。

背景技术

麦冬为百合科植物Ophiopogon japonicus（L.f）Ker-gawl.的干燥块根。麦冬在我国有着悠久的药用历史，主要含有麦冬主要化学成分为甾体皂苷、多糖，还有高异黄酮类、氨基酸等，这些成分共同起作用使麦冬具有广泛的药理作用，主要表现为抗心肌缺血和心肌梗塞作用；免疫调节作用；降低血糖作用；抗肿瘤作用等。而大部分研究表明起主要作用的是麦冬皂苷和多糖，国内外对麦冬的活性成分的提取工艺和药效研究始终非常活跃，特别是对于麦冬皂苷的报道多见，但是今年来随着分离、分析手段的提高，对于麦冬多糖的研究也取得了较大的进展。

麦冬多糖为麦冬的活性成分。研究表明麦冬多糖具有增强机体免疫调节功能及增强化疗药物抗肿瘤作用，对肿瘤有明显的抑制作用。

实验表明，麦冬多糖能诱生肿瘤坏死因子和干扰素-γ，对肿瘤细胞有杀伤和抑制作用。肿瘤坏死因子是由激活的巨噬细胞/单核细胞系统产生的多功能蛋白分子，在机体内起着重要的生理作用。在体内肿瘤坏死因子可以通过三种途径发挥抗肿瘤作用：直接杀伤肿瘤细胞；作用于肿瘤血循环，导致肿瘤组织血供减少，从而影响肿瘤的生长；激活机体免疫系统的抗肿瘤作用。同时，肿瘤坏死因子还可介导炎性过程，减少网膜组织间皮细胞溶纤维蛋白活性，进而使网膜表面纤维蛋白增多，减少组织外渗。干扰素是细胞在受到刺激物作用后合成并释放出的蛋白性淋巴因子，其作用为：直接抗病毒作用；增强主要组织相容性抗原和肿瘤相关抗原的表达；增强自然杀伤细胞（NK）的细胞毒作用；增强抗体依赖性细胞的细胞毒作用；直接的抗细胞增值作用和抗血管生成作用。同时麦冬多糖能增强T淋巴细胞及NK细胞活性，提高了机体的免疫调节功能，而有利于抗肿瘤作用的发挥。

其次，麦冬多糖具有免疫调节作用，可以用于糖尿病等。

麦冬多糖具有显著增强单核吞噬细胞系的功能，麦冬多糖可明显增加巨噬细胞的吞噬指数。麦冬多糖能促进抗体和补体的形成，可以显著增加血清补体和血清IgG的含量。

专利200710040543.6公开了一种麦冬多糖的制备方法，其提纯方法为：

A）取干燥麦冬块根，压扁，用8-12倍量水提3次，合并水提液，并将其减压浓缩至0.5-1g/ml,加入75%-95%乙醇至含醇量达60%-80%，静置过夜，倾去上清液，沉淀重复醇沉1次，冷冻干燥，得淡黄色麦冬粗多糖粉末；

B）将麦冬粗多糖粉末用15倍水溶解，采用超滤方法分离，其中：超滤膜的材料选自醋酸纤维膜、聚砜、聚酰胺或磺化聚砜；超滤膜的形状采用平板式、中空纤维式、管式或卷式；超滤压力为0.1-0.3Mpa，超滤膜的截留分子量指标为10000；

C）麦冬多糖的纯化，超滤后的浓缩液通过型号为D-301、D-355、D-315或D-345的大孔弱碱性阴离子交换树脂，用水洗脱，收集4-8倍柱体积的洗脱部分，合并，干燥，即得麦冬多糖MDG-1。

此提纯方法仅采用了多次水煮醇沉、冷冻干燥、制备粗多糖，超滤膜的截留分子量为10000，纯化采用阴离子交换树脂，与本专利采用截留分子量5kd膜不同。

专利申请 201110326803.2公开了一种麦冬多糖的制备方法：

A）该麦冬多糖为包含阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖的杂多糖，其中半乳糖和葡萄糖的比例为1:1-3，阿拉伯糖含量为1-10%，重均分子量为2-10万。

B）该多糖制备方法为水提取，浓缩，去蛋白，醇沉，离子交换层析，冷冻干燥；

此专利申请在水提的基础上采用了离子交换层析的分离纯化，但所含杂质仍然比较多，麦冬多糖的分子量分布未确定。

上述授权或公开的专利所采用的麦冬多糖提取工艺，麦冬多糖含量均未达到《中药、天然药物注射剂基本技术要求》（国食药监注[2007]743号）关于“有效陈份制成的注射剂，主成分含量应不少于90%。多成份制成的注射剂，所测成分应大于总固体量的80%”的质量标准。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种过程简单、操作方便的麦冬多糖提取、分离纯化方法，所制得的麦冬多糖纯度高、溶解性好、分子量分布均一，可用于制备麦冬多糖注射剂。为临床提供一种新的药用物质。

本发明的麦冬多糖提取工艺，采用膜分离工艺，用5kDa膜包，去除高分子、难溶性多糖及杂质，，得到高纯度均一麦冬多糖。

本发明所述的麦冬多糖的分离、纯化方法，包括以下步骤：