[发明专利]一种正品大黄种子的检测方法

权利要求书

1.一种正品大黄种子的检测方法，它是采用高效液相色谱法检测，包括如下步骤：

（1）取待检种子，粉碎，用甲醇提取，过滤，得滤液，除去甲醇，酸水解，用有机溶剂萃取，得有机溶剂层，回收溶剂至干，再溶解，制成供试品溶液；

（2）取芦荟大黄素对照品，溶解，制备对照品溶液；

（3）用高效液相色谱法检测，在供试品溶液的色谱图中，有色谱峰与芦荟大黄素对照品色谱峰保留时间一致，鉴定待检种子中含有正品大黄种子，色谱条件如下：固定相：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相：甲醇-0.1％磷酸溶液，二者的体积比为（80~90）：（10~20）；检测波长：254nm。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述酸水解，溶液中氢离子的浓度为2~3mol/L；所述有机溶剂为三氯甲烷。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤（1）中，将待检种子粉碎，过四号筛，得粉末，加甲醇，粉末与甲醇的质量体积比为1：150~185，加热回流30~90min，冷却，称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，得续滤液，挥去溶剂，加浓度为6~10%的盐酸，超声处理1~3min，加等体积的三氯甲烷，加热回流60~80min，再用三氯甲烷萃取3次，每次所用三氯甲烷体积同盐酸体积，得三氯甲烷层，回收溶剂至干，加甲醇制成供试品溶液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（3）中，甲醇与0.1％磷酸溶液的体积比为85：15。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：它还包括定性检测方法，步骤如下：

1）取待检种子，粉碎，用甲醇提取，过滤，得滤液，挥去溶剂，酸溶液水解，用有机溶剂萃取，得水层；

2）取步骤1）所得水层，加1~3倍体积的浓氨水，震摇，无红棕色至棕褐色絮状沉淀；

3）鉴定待检种子为正品大黄种子。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤1）所述酸水解，溶液中氢离子的浓度为0.52~2mol/L；有机溶剂为乙醚。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述步骤1）中，将待检种子粉碎成细粉，加甲醇，细粉与甲醇的质量体积比为1:15~25，浸泡30min~90min，过滤，得滤液，蒸干，加水，再加浓盐酸，盐酸体积为水体积的1/20~1/5，加热回流20~40min，冷却，用乙醚萃取，萃取2次，每次所用乙醚体积为水体积的3~5倍，得水层。