[发明专利]一种高纯度构树素的分离制备工艺

说明书

技术领域

本发明属于天然产物分离领域，涉及一种高纯度构树素的分离制备工艺，尤其是一种应用硅藻土脱色、聚酰胺树脂富集和高速逆流色谱制备构树素的方法。

背景技术

剑叶龙血树（Dracaenacochinchinensis (Lour.) S.C.chen）为“龙血竭”的来源植物，主产于广西、云南等省区，“龙血竭”属于树脂类药材，是贵重中药进口血竭的国产替代品。主要含有黄酮类、皂苷类、茋类、酚类、有机酸、酯类和挥发油等成分。具有抗炎，抗细菌、真菌，镇痛，活血，止血，改变血液流变学等药理作用，临床上用于治疗外壳、妇科、内科、五官科、皮肤科的多种适应症。

构树素是剑叶龙血树树脂中的有效成分之一，含量较高，药理研究表明，构树素具有较显著的抗真菌作用，对Bipolars leersiae的抑制浓度为10-100μM。国内对构树素的研究尚处于起步阶段，中国专利201010554172.5以构树枝条为原料，采用微波萃取、大孔树脂吸附、正己烷结晶等手段提取分离得到构树素，构树中构树素的含量较低，大孔树脂吸附率较低，工业化生产难以得到高含量的有效成分。

发明内容

本发明要解决技术问题是提供一种高纯度构树素的分离制备工艺，该方法获得的产品纯度高。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种高纯度构树素的分离制备工艺，其特征在于包括以下步骤：以剑叶龙血树树脂为原料，粉碎，加入4-10倍量65-90%的乙醇超声提取，提取液加入适量硅藻土保温脱色，脱色液浓缩，通过聚酰胺树脂柱富集，75-85%的乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离得到构树素。

所述硅藻土为用量为液体量的0.2-0.5%。

所述高速逆流色谱的两相溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水，体积比为（2-5）：（2-5）：（2-3）：（3-5），上相为固定相，下相为流动相，色谱仪转速为800-900rpm。

本发明具有以下优点：采用超声提取效率高，能耗低；硅藻土脱色，除去部分杂质，提高柱层析吸附率；本发明采用高速逆流色谱进行精制，获得的产品品质好，符合食品药品的要求。本发明方法不仅适合实验室小规模提取分离，也适合规模化大生产。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1：

取1kg剑叶龙血树树脂，粉碎，加入4L75%的乙醇超声提取2次，每次1.5h，超声频率为40KHz，过滤得到提取液，提取液加入0.3%硅藻土，55℃保温脱色30min，脱色液浓缩至无醇味，通过聚酰胺树脂柱，先用水洗脱杂质，再用3BV80%的乙醇溶液洗脱，收集富含构树素的洗脱液，浓缩干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离，以正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水（4:4:3:4）为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，先后泵入固定相和流动相，设定流动相流速为3ml/min，同时启动主机，调节转速为850rpm，待管柱内溶剂系统达成动态平衡，进样，收集高浓度构树素流分，浓缩干燥即得构树素1.2g，含量为96.2%。

实施例2：

取1kg剑叶龙血树树脂，粉碎，加入8L90%的乙醇超声提取1次，每次2h，超声频率为40KHz，过滤得到提取液，提取液加入0.3%硅藻土，50℃保温脱色60min，脱色液浓缩至无醇味，通过聚酰胺树脂柱富集，先用水洗脱杂质，再用4BV75%的乙醇溶液洗脱，收集富含构树素的洗脱液，浓缩干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离，以正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水（2:2:2:3）为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，先后泵入固定相和流动相，设定流动相流速为2.5ml/min，同时启动主机，调节转速为880rpm，待管柱内溶剂系统达成动态平衡，进样，收集高浓度构树素流分，浓缩干燥即得构树素0.9g，含量为98.3%。

实施例3：