[发明专利]一种制备高纯度荛花酯J的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然植物技术领域，涉及一种制备高纯度荛花酯J的方法。

背景技术

荛花酯J属于二萜类化合物，CAS登录号为206193-11-5，分子式为C₃₆H₅₂O₁₁，分子量为660.80，从瑞香科（Thymelaeceae）植物微凹荛花Wikstroemia retusa A.Gray树皮及茎中分离得到。药理研究表明，荛花酯J具有细胞毒活性，对P399呈细胞毒活性，半数生长抑制剂量为GI₅₀为4.62ng/mL（对照品cisplatin为14.8ng/mL），值得深入开发与研究。目前，对荛花酯J的研究较少，经检索，尚未发现适宜于大量制备荛花酯J的工业化方法的专利或文献报道。

发明内容

针对上述情况，本发明的目的是提供一种制备高纯度荛花酯J的方法，可有效解决从微凹荛花植物中提取荛花酯J的问题。

本发明是通过如下技术方案实现的：

将微凹荛花树皮粉碎，经体积百分比浓度为60-95%的乙醇或甲醇溶液浸泡1-2h，然后加热至75-85℃索氏提取提取4-10h，提取液减压回收至无醇味，加水分散，上大孔吸附树脂柱，收集洗脱液浓缩，用乙醚萃取，萃取液浓缩干燥得到荛花酯J粗品，最后用反相高效液相色潽法分离精制得到荛花酯J对照品，纯度达98%以上。

所述大孔吸附树脂型号可选AB-8、D101、HPD100、HP20、LDA-10等。

所述大孔吸附树脂洗脱剂为乙醇或丙酮溶液，先用5-20%乙醇或丙酮溶液洗脱，再用50-80%乙醇或丙酮溶液洗脱，收集50-80%的乙醇或丙酮洗脱液。

所述反相高效液相色潽法色谱条件为：流动相为乙腈-甲醇-水，体积比为32-45:35-55:8-30，流速20-50ml/min，检测波长261nm。

本发明的有益效果是：采用索氏提取，可实现连续提取，同时浓缩提取液，既节约溶剂，又提高了萃取率；大孔树脂吸附洗脱，提高了产品的纯度；采用反相高效液相色潽法精制纯化，可使产品纯度高达98%以上。本发明工艺稳定，适用于规模化生产。

具体实施方式：

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步说明。

实施例1：

将微凹荛花茎树皮粉碎，称取10kg，加入相当于原料量5倍的75%甲醇溶液浸泡1.5h，然后加热至75-85℃索氏提取6h，收集提取液取液减压回收甲醇至无醇味，加水溶解分散，离心，上清液上HP20大孔吸附树脂柱，依次用水冲柱至洗脱液无色、用10%乙醇溶液冲柱至洗脱液流出无色，最后用65%乙醇溶液冲柱至洗脱液流出无色，收集65%乙醇洗脱液，减压浓缩，用乙醚反复萃取4次，萃取液浓缩干燥得荛花酯J粗品。将荛花酯J粗品用甲醇溶解，微孔滤膜滤过，经制备高效液相色谱分离，色谱柱：C18，流动相：乙腈-甲醇-水（45:40:15），流速40ml/min，以紫外检测器检测指导产品收集，检测波长261nm，连续进样，收集含有荛花酯J的高纯度流分，浓缩干燥得产品119mg，含量为98.5%。

实施例2：

将微凹荛花茎树皮粉碎，称取10kg，加入相当于原料量6倍的80%乙醇溶液浸泡2h，然后加热至75-85℃索氏提取5h，收集提取液取液减压回收乙醇至无醇味，加水溶解分散，离心，上清液上AB-8大孔吸附树脂柱，依次用水冲柱至洗脱液无色、用5%丙酮溶液冲柱至洗脱液流出无色，最后用55%丙酮溶液冲柱至洗脱液流出无色，收集55%丙酮洗脱液，减压浓缩，用乙醚反复萃取6次，萃取液浓缩干燥得荛花酯J粗品。将荛花酯J粗品用甲醇溶解，微孔滤膜滤过，经制备高效液相色谱分离，色谱柱：C18，流动相：乙腈-甲醇-水（34:36:30），流速20ml/min，以紫外检测器检测指导产品收集，检测波长261nm，连续进样，收集含有荛花酯J的高纯度流分，浓缩干燥得产品117mg，含量为98.7%。

实施例3：