[发明专利]挖掘真核生物基因转录调控组差异蛋白的方法

权利要求书

1.挖掘真核生物基因转录调控组差异蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）将5’或3’端带有生物素的启动子序列或其片段与表面吸附有链亲和素的磁珠结合，形成磁珠-启动子二元复合物；

2）分别从处于不同生长、发育或分化阶段的细胞或组织中提取核蛋白，然后分别将这些特定时期的核蛋白与磁珠-启动子二元复合物结合，从而形成磁珠-启动子-核蛋白三元复合物；

3）对步骤2）中得到的三元复合物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，找出差异条带，以确定所要候选目的蛋白的片段长度，然后进行二维电泳分离提纯目的蛋白，并对分离纯化的目的蛋白进行质谱分析或氨基酸测序，从而确定所含蛋白。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2）为：分别从处于不同生长、发育或分化阶段的细胞或组织中提取核蛋白，并分别将这些特定时期的核蛋白与能够封闭所述启动子序列或其片段上非特异性蛋白结合位点的蛋白混合，然后分别将这些混合好的蛋白与磁珠-启动子二元复合物结合，从而形成磁珠-启动子-核蛋白三元复合物。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，能够封闭所述启动子序列或其片段上非特异性蛋白结合位点的蛋白为BSA蛋白或脱脂奶粉。